Capacitación in vitro y reacción acrosomal en espermatozoides de semen porcino fresco y criopreservado: participación de la enzima succinato deshidrogenasa

PEREYRA V; BREININGER E; PEREZ COLMAN M; SATORRE MM; RODRIGUEZ PC

Congreso; XII Simposio Internacional de Reproducción Animal.; 2017

La criopreservación de espermatozoides en la especie porcina presenta escaso desarrollo debido principalmente a la falta de indicadores de congelabilidad que aseguren resultados compatibles con una aplicación comercial. El objetivo fue determinar la actividad de la enzima succinato deshidrogenasa (SDH) y estudiar su participación en la capacitación y reacción acrosomal (RA) en espermatozoides porcinos frescos y criopreservados. La actividad de la enzima se determinó espectrofotométricamente y la unidad enzimática (UE) se definió como la cantidad de SDH que cataliza la reducción de un µmol de DCPIP/minuto. Espermatozoides frescos o criopreservados se incubaron en TBM con bicarbonato (40 mM) o fluido folicular (30%), como inductores de capacitación y reacción acrosomal, respectivamente. Los porcentajes de espermatozoides capacitados o con acrosoma reaccionado se determinaron, en presencia de malonato de sodio (inhibidor específico de SDH), por la técnica de cloro tetraciclina y la técnica de azul tripán combinada con contraste interferencial diferencial, respectivamente. También se evaluaron la vitalidad por eosina/nigrosina y la motilidad por microscopía óptica. Los resultados se expresaron como promedio ± DE y fueron evaluados por análisis de varianzas y test de Bonferroni. La actividad de SDH fue de 0,44±0,16 y 0,7±0,1 UE/1010esp. en espermatozoides frescos y criopreservados, respectivamente. El malonato disminuyó significativamente la capacitación a partir de 5 o 1 mM sin afectar a dicha concentración ni la movilidad ni la vitalidad. La RA fue afectada a partir de 5 mM de inhibidor, sin observarse efectos a dicha concentración en la movilidad o la vitalidad. Los espermatozoides porcinos frescos y criopreservados presentan diferente actividad de SDH y dicha actividad estaría relacionada con los resultados obtenidos en capacitación y RA, procesos involucrados en la adquisición de la capacidad fecundante.