EVALUACIÓN DE LA TÉCNICA DE PCR DE TEJIDO COMO POSIBLE SCREENING PARA DETECTAR INFECCIÓN DE TUBERCULOSIS EN CIERVOS

FRETES M; FALZONI, ELVIRA; SAHAGIAN G; PONCE LOREANA; SOLEDAD BARANDIARAN; MARFIL, MARÍA JIMENA; MARCELA MARTINEZ VIVOT

CABA

Jornada; XI Jornadas de Jóvenes Investigadores; 2022

UBA

EVALUACIÓN DE LA TÉCNICA DE PCR DE TEJIDO COMO POSIBLE SCREENING PARA DETECTAR INFECCIÓN DE TUBERCULOSIS EN CIERVOSSAHAGIAN, G1; FRETES, M1; MARFIL, MJ1; PONCE, L1y2; FALZONI, E; MARTÍNEZ VIVOT, M; BARANDIARAN, S1y21Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias. Cátedra de Enfermedades Infecciosas. 2CONICET-Universidad de Buenos Aires. Instituto de Investigaciones en Producción Animal (INPA). Buenos Aires. Argentina. La tuberculosis bovina (TBb) es una enfermedad crónico-infecciosa de gran importancia a nivel sanitario en todo el mundo. En el ámbito veterinario, genera enormes pérdidas productivas en países donde la producción bovina es de vital importancia para su economía. Resulta entonces imposible quitar de la ecuación, sobre todo en el contexto de “Una sola salud” promovido exhaustivamente por la OIE, a la fauna silvestre como posible reservorio epidemiológico clave en la diseminación, permanencia y progreso de dicha patología. El objetivo de este trabajo fue detectar al agente causal de la TBb a través de la técnica de reacción en cadena de la polimerasa (PCR) y evaluar su potencial como herramienta de diagnóstico rápido de la misma, a partir de muestras de tejido de ciervos (Axis axis) del Parque Nacional “El Palmar”. Dichas muestras habían sido recolectadas durante una jornada de caza dentro de un proyecto de control poblacional y ninguna presentaba lesiones compatibles. Se realizó la extracción de ADN genómico a 28 muestras de tejido (linfonódulos submandibular, parotídeo y retrofaríngeo) utilizando el Kit de extracción “ADN Puriprep T-Kit” (InBio Highway, Argentina) siguiendo el protocolo sugerido por el fabricante. Se buscó amplificar las secuencias que codifican para la proteína del shock térmico hsp65 (presente en todas las micobacterias) e IS6110 (presente únicamente el Complejo Mycobacterium tuberculosis) en pos de confirmar la presencia de la enfermedad. Adicionalmente, para chequear que la extracción de ADN fue realizada correctamente, se amplificó un gen conservado de mamíferos, el 16S ARN ribosomal. No se detectó la presencia de micobacterias mediante las PCR y sí se corroboró la presencia de material genético de los animales mediante la amplificación del 16S, demostrando que la técnica de extracción se hizo correctamente. Simultáneamente las muestras fueron cultivadas obteniéndose desarrollo en dos de ellas, una se caracterizó como Mycobacterium bovis y la otra como una micobacteria ambiental. Esto último sugeriría que la PCR de órgano como técnica de screening en muestras de tejidos sin lesiones en los ciervos axis no sería una técnica sensible para la detección de TBb. Sin embargo, se necesitaría un estudio con un muestreo más grande para poder concluir esto con mayor precisión.