Efecto de lre-1, inhibidor de adenilato ciclasa soluble, en la capacitación con ácido hialurónico de espermatozoides criopreservados bovinos

FERNÁNDEZ S; CÓRDOBA M

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Jornada; XI jornadas de jóvenes investigadores; 2022

Facultad de Ciencias Veterinarias

EFECTO DE LRE-1, INHIBIDOR DE ADENILATO CICLASA SOLUBLE, EN LA CAPACITACIÓN CON ÁCIDO HIALURÓNICO DE ESPERMATOZOIDES CRIOPRESERVADOS BOVINOSFernández S1,3, Córdoba M1,2,31Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias. Instituto de Investigación y Tecnología en Reproducción Animal (INITRA). Buenos Aires, Argentina. 2CONICET-Universidad de Buenos Aires. Unidad Ejecutora de Investigaciones en Producción Animal (INPA). Buenos Aires, Argentina. 3Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias. Cátedra de Química Biológica. Buenos Aires, Argentina. Durante la capacitación espermática inducida por ácido hialurónico, se activan señales intracelulares a partir de la unión del inductor con su receptor de membrana CD44, que involucran la participación de diferentes enzimas claves. Este mecanismo de acción que se desencadena por el efecto del ácido hialurónico en el espermatozoide bovino no está aun completamente dilucidado y podría incluir la activación de las isoenzimas de adenilato ciclasa. El objetivo de este trabajo fue determinar la variación de la capacitación, la viabilidad y la motilidad de espermatozoides criopreservados bovinos tratados con ácido hialurónico y un inhibidor de adenilato ciclasa soluble. Como inductor de la capacitación in vitro se utilizó ácido hialurónico (1000 µg/ml por 60 minutos) y LRE-1 (6-Cloro-N4-ciclopropil-N4-(2-tienil metil)-2,4-pirimidina diamina) como inhibidor alostérico de adenilato ciclasa soluble (100 µM por 60 minutos). La capacitación fue evaluada por la técnica epifluorescente de clorotetraciclina y la viabilidad e integridad de membranas por la tinción vital de azul tripán con contraste diferencial interferencial. La motilidad espermática fue evaluada por microscopía y analizada con el software ISAS-Prosier. Los datos fueron analizados con ANOVA y test de Tukey (P0,05). Sin embargo, la amplitud media del desplazamiento lateral de la cabeza y la frecuencia de batida de la cola disminuyeron significativamente en las muestras con ácido hialurónico/LRE-1 (0,12±0,05μm y 0,30±0,10Hz, respectivamente) respecto a las muestras capacitadas con ácido hialurónico (2,22±0,05μm y 8,37±3,68Hz, respectivamente). La viabilidad no disminuyó por efector del inhibidor en las muestras tratadas con ácido hialurónico/LRE-1(P>0,05). Por la tanto, a partir de la unión específica entre el ácido hialurónico y su receptor de membrana CD44 en espermatozoides bovinos criopreservados, la isoenzima soluble de adenilato ciclasa participaría en el mecanismo de transducción de señales intracelulares durante la capacitación in vitro y modularía parámetros de motilidad que están involucrados en la fertilización.