OPTIMIZACIÓN DEL DIAGNÓSTICO DE TUBERCULOSIS EN ANIMALES SILVESTRES DE ARGENTINA MEDIANTE LA IMPLEMENTACIÓN DE UNA REACCIÓN EN CADENA DE LA POLIMERASA MÚLTIPLE.

PONCE LOREANA; PIRAS, INDIANA; BARANDIARAN, SOLEDAD; ROSSO PAULA; MARCELA MARTINEZ VIVOT; JIMENA MARFIL; FALZONI, ELVIRA

CABA

Jornada; X Jornadas de Jóvenes Investigadores; 2021

La tuberculosis bovina es una enfermedad zoonótica reemergente y endémica causada por M.bovis. Si bien el ganado bovino es considerado su hospedador primario, otras especies domésticas y silvestres son capaces de mantener eficientemente la enfermedad. En Argentina, su prevalencia en animales de producción es conocida. En especies silvestres es poco estudiada, desconociéndose el rol epidemiológico que podrían desempeñar estos animales en nuestros ecosistemas. En este sentido, una de las limitantes en su determinación se debe a que las técnicas diagnósticas disponibles utilizadas sobre animales domésticos no pueden ser aplicadas en fauna silvestre en forma generalizada, puesto que no poseen la misma reproductibilidad. Teniendo en cuenta la creciente importancia epidemiológica de la interrelación entre la fauna silvestre, la ganadería y el ser humano, el desarrollo de herramientas de detección rápida de alta especificidad y sensibilidad es vital. La Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR) múltiple es una buena técnica para detectar e identificar las micobacterias que integran el complejo Mycobacterium tuberculosis (CMT), al que pertenece M. bovis, y diferenciarlas de otras micobacterias patógenas y saprófitas de distribución mundial que pueden afectar la salud humana y animal, en una sola reacción de amplificación. Con este fin, se adaptó la técnica de PCR-triplex a punto final descrita por Wilton & Cousins (1992). Se utilizaron primers específicos que permiten la identificación de las bacterias pertenecientes al género Mycobacterium, al complejo Mycobacterium avium (MAC) y al CMT. Se recolectaron, procesaron y cultivaron muestras de animales silvestres. Un total de 64 cultivos desarrollaron colonias compatibles o sufrieron cambios de coloración. De ellos, 51 muestras resultaron ZN positivas y se procesaron por PCR-triplex. Todas las muestras provenientes de animales mantenidos en cautiverio sin signología específica resultaron negativas, tanto al cultivo bacteriano como a las técnicas de diagnóstico molecular. Por el contrario, 29 muestras provenientes de necropsias de ciervo axis, jabalí, venado de las pampas, tapir y pecarí de collar resultaron positivas a ambas técnicas, aún sin presentar lesiones tuberculosas en la mayoría de los casos. De ellas, 3 fueron identificadas como micobacterias pertenecientes al MAC, 6 como parte del CMT y 20 como pertenecientes al género Mycobacterium. Estos resultados fueron comparados con las 3 técnicas de PCR tradicionalmente utilizadas en la identificación de estos grupos. En cuanto a la concordancia entre las técnicas moleculares, 44 muestras fueron confirmadas por las técnicas tradicionales, 5 no coincidieron y 2 quedaron incompletas. En conclusión, la aplicación de esta técnica provee información confiable sobre la presencia de micobacterias, patógenas y saprófitas, en muestras de fauna silvestre y aporta información para estudiar la existencia de reservorios de tuberculosis en nuestro país.Este trabajo es financiado por el proyecto UBACyT 20020170100153BA.