Regulación de la secreción de Interleuquina-1beta en células de epitelio respiratorio con Fibrosis Quística (deltaF508)

JUAN M. FIGUEROA; MARÍA MACARENA MASSIP COPIZ; TOMÁS A. SANTA COLOMA; CONSUELO MORI; MARIÁNGELES CLAUZURE; ANDREA V. DUGOUR; ANGEL GABRIEL VALDIVIESO

Congreso; 8° Congreso Argentino de Neumonología Pediátrica; 2018

Sociedad Argentina de Pediatría

Introducción: La Interleuquina-1β (IL-1β) es una citoquina proinflamatoria producida tanto en células inmunes como en el epitelio respiratorio. Estudios previos sugieren un papel de la IL-1β en la patogénesis del daño pulmonar en la Fibrosis quística (FQ) (IL-1β aumentada en BAL, asociación entre polimorfismos en el gen IL-1β y severidad de la FQ, y aumento de IL-1β en células inmunes en modelos murinos o en cultivos de células FQ). Existe controversia en cuanto a si este aumento se origina en inmunocitos o en el epitelio bronquial, y si es una respuesta a las infecciones recurrentes o es propio de la FQ. Objetivos: Estudiar la dinámica de la IL-1β y sus mecanismos de control en cultivos de células de epitelio respiratorio FQ (ΔF508). Material y Métodos: Se cultivaron células de una línea de epitelio respiratorio FQ y células de la misma línea con el gen CFTR reestablecido por transfección. Ambos tipos celulares se trataron con IL-1β exógena, anticuerpo bloqueante de IL-1β y antagonistas del receptor de IL-1. Las líneas celulares fueron tratadas igualmente con un inhibidor del CFTR. En un último tipo de experimento se expuso a las células a concentraciones crecientes de Cl- luego de tratarlas con ionóforos para equilibrar el Cl- extra e intracelular independientemente del CFTR. En cultivos basales y con todos los tratamientos se midieron la secreción de IL-1β al medio y las concentraciones intracelulares de su ARNm e IL-1β inmadura y madura. Para el análisis estadístico se utilizaron los tests de ANOVA y Tukey (p< 0.05). Resultados: Las células FQ liberan un 40% más de IL-1β que las células control. Asimismo, la adición del inhibidor del CFTR a las células control se asocia con un aumento en la expresión de IL-1β. Las concentraciones de Cl- intracelular son mayores en las células ΔF508 y aumentan también en las células control al inhibir el CFTR. El aumento del Cl- intracelular por ionóforos aumenta la expresión de ARNm IL-1β, de IL-1β inmadura y madura intracelulares, y la secreción de la citoquina. Los tratamientos con anticuerpo bloqueante de IL-1β y antagonistas del receptor IL-1 inhibieron los cambios inducidos por las variaciones del Cl-. Conclusiones: La disfunción del CFTR da lugar a un aumento del Cl- intracelular que promueve la maduración y liberación de IL-1β. La acción de IL-1β sobre los receptores IL-1 de las propias células (acción autócrina) aumenta la síntesis de ARNm de IL-1β generando de esta manera un mecanismo de loop proinflamatorio.