Los exosomas de semen inhiben la infección del virus del Zika en células dendríticas

L. CASTILLO; A. PALETTA; F. REMES LENICOV; F. DI DIEGO GARCÍA; A. CEBALLOS; A. VARESE; J. GEFFNER

Vaquerías, Cordoba

Conferencia; XXXIX Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Virología (SAV); 2019

Sociedad Argentina de Virología

En los últimos años se han reportado diversos eventos de transmisión sexual del virus Zika (ZIKV), cambiando el paradignma de la interacción arbovirus-huésped. Además, se ha observado que ZIKV infeccioso puede ser detectado en el semen hasta seis meses después del inicio de los síntomas. Por otra parte, el plasma seminal (PS) contiene billones de exosomas, pequeñas vesículas extracelulares que median la señalización intercelular. Sabiendo que el semen no es simplemente un portador de enfermedades de transmisión sexual, nuestro objetivo fue evaluar el papel de los exosomas de semen (SE) en la infección por ZIKV de las células dendríticas (CDs).Las muestras de plasma seminal fueron obtenidas de dadores sanos y los exosomas de semen (SE) fueron purificados por medio de una cromatografía de exclusión por tamaño. Los preparados de vesículas obtenidos fueron analizados por western blot y por microscopía electrónica. Las CDs se obtuvieron a partir de monocitos de sangre periférica (mediante un gradiente de densidad) diferenciados con GM-CSF e IL-4 (30ng/ml) durante 5 días. La infección de ZIKV se cuantificó por qPCR, UFP/ml, citometría de flujo y microscopía de epifluorescencia. El fenotipo de las CDs se analizó por citometría de flujo y la producción de citoquinas por ELISA. Se evaluó la proteómica de los preparados de exosomas.Inicialmente infectamos CDs (2X105) con ZIKV (2x105ufp) en presencia o ausencia de PS o PS depletado de SE (1/100 a 1/100000 dil) o SE (200ug/ml) durante 48 hs. Observamos que la presencia de PS inhibió la infección, mientras que PS-SE no lo hizo (p