CD32 expression (receptor for the Fc portion of IgG) promotes the activation of CD4+ and CD8+ T cells of infants with severe Respiratory Syncytial Virus infection

RAIDEN, SILVINA; GEFFNER, JORGE; SANANEZ, INÉS; DE LILLO, LEONARDO; SEERY, VANESA; ARRUVITO, LOURDES

Congreso; XV Congreso Argentino de Microbiología; 2019

Introducción y objetivosLa infección por el virus sincicial respiratorio (VSR) es la principal causa de hospitalización en niños menores de 12 meses de edad. Los anticuerpos IgG pueden modular la respuesta inmune a través de los receptores de la porción Fc de IgG (FcgR). Previamente reportamos que las células T CD4 + de adultos sanos expresan FcgR tipo II (CD32). La expresión y función de CD32 en las células T de niños con VSR aún no ha sido analizado. Nuestro objetivo principal es determinar si los anticuerpos contra el VSR, a través de su unión al receptor CD32, promueven la infección de las propias células T por el virus o afectan la función de las mismas células T de una manera que podría potenciar la enfermedad por VSR en infantes con infecciones por este virus. Materiales y métodosSe trabajó con células mononucleares (PBMCs) aisladas de muestras de sangre periférica de niños con VSR (n=98) hospitalizados por bronquiolitis severa, y niños controles (n=46), apareados en sexo y edad, admitidos para cirugía programada. Evaluamos:1.La expresión e isoformas (activadora e inhibidora) del CD32 en las células T de los pacientes por citometría de flujo y por RT-qPCR respectivamente.2.La capacidad de unir complejos inmunes usando IgG humana agregada por calor en ausencia y presencia de un anticuerpo bloqueante por citometría de flujo. 3.La co-expresión de marcadores de activación (CD25, HLA-DR) por citometría de flujo. 4.La respuesta de las células CD4+ al estímulo específico de CD32 mediante el análisis de los niveles de citocinas secretadas por ensayos multiplex (LEGENDplex).5.El porcentaje de infección por VSR de células T de los pacientes en ausencia o presencia de una dosis subóptima de anticuerpo neutralizante por citometría de flujo.ResultadosSe observó una mayor frecuencia de células T CD32+ CD4+ y CD8+ en niños VSR+ (n = 49) en comparación con los niños controles (n = 29, ****), con predominio de la isoforma activadora. Interesantemente, la expresión de CD32 en células T CD4+ y CD8+ de niños VSR+ está asociada con marcadores de activación como CD25 y HLA-DR (**). En concordancia, las células T CD4+ y CD8+ de niños VSR+ unieron IgG agregada (n=13, ***), la cual se redujo ante la adición de anti-CD32. Desde el punto de vista funcional, el estímulo a través de CD32, promovió la secreción de un diverso patrón de citocinas por las células T CD4+ de niños VSR+, IL2 (****), IFN-g (*) TNF-a (*), IL-4 (**), IL-6 (**), IL-10 (*) e IL8 (*). Finalmente, el VSR acomplejado con anticuerpos específicos no potencia la infección de las propias células T CD4+ y CD8+. ConclusionesNuestras observaciones indican que la infección por VSR induce un aumento en la frecuencia de células T CD4+CD32+ y CD8+CD32+. Asimismo, este receptor ejerce una acción estimulatoria sobre las células T CD4+ y CD8+ al potenciar su activación sin promover la infección en presencia del virus acomplejado. La caracterización de este mecanismo podrá mejorar las estrategias terapéuticas disponibles o promover otras.