COINFECCIÓN TRYPANOSOMA CRUZI-HIV EN ASTROCITOS. IMPACTO EN LA APOPTOSIS Y LA REPLICACIÓN VIRAL

OJEDA D E; JORGE QUARLERI; URQUIZA J; PASCUALE CARLA; BURGOS, JUAN M.; LEGUIZAMÓN M. SUSANA

Congreso; XII Congreso Argentino de Virología; 2017

Trypanosoma cruzi (Tc) es el agente etiológico de la enfermedad deChagas que en individuos inmunocomprometidos coinfectados por elvirus de inmunodeficiencia humana (HIV) puede comprometerseriamente el sistema nervioso central (SNC). Se reportó que losastrocitos -células más abundantes del SNC- son permisivas de infecciónseparadamente por cada uno. Como objetivos, se pretende (a)esclarecer si ambos pueden cohabitar intracelularmente, (b) analizar elimpacto en la apoptosis celular, y (c) estudiar el impacto en lamultiplicación recíproca. Para ello, astrocitos humanos en cultivosconvencionales y en transwell fueron infectados con ambos patógenossiguiendo esquemas definidos. A fines de lograr mayores niveles deinfección por HIV y realizar evaluaciones cuantitativas de las eficienciasde infección por cada uno, se construyeron pseudovirus del HIVexpresando la glicoproteína G del VSV y se modificaron genéticamentetanto HIV como Tc para que expresen fluoróforos (GFP, DsRed),respectivamente. Empleando ensayos de ELISA, microscopia defluorescencia y citometría de flujo se evaluaron (I) nivel de apoptosiscelular (anexina V, caspasas 3/7), (ii) eficiencia de infección por HIV y Tc,(iii) infectividad de la progenie viral (en células GHOST), (iv) niveles decitoquinas celulares del perfil Th1/Th2/Th17 y, (v) acción del exoantígenoparasitario transialidasa (formas activa e inactiva). El análisis de losresultados incluye comparaciones estadísticas empleando la prueba t deStudent, con significación p