El aumento de la actividad de HIF-1alpha inducida por HIV-1 en células T CD4+ modifica su fenotipo inmunometabólico y disminuye la supervivencia celular.

OSTROWSKI, MATIAS; GERBER, PEHUÉN PEREYRA; GEFFNER, JORGE; DUETTE GABRIEL; PALMER, CLOVIS S.; RUBIONE, JULIA

Buenos Aires

Congreso; XII Congreso Argentino de Virología; 2017

Asociación Argentina de Microbiología

Introducción: La activación y la disfunción crónica de células T son características de la infección por HIV-1. El Factor Inducible por Hipoxia-1α (HIF-1α) es un factor de transcripción crítico en la coordinación del metabolismo, de la diferenciación y de la función efectora de las células T. Teniendo en cuenta que el metabolismo de las células T influye en su funcionalidad, planteamos la hipótesis de que la disfunción de Linfocitos T CD4 + durante la infección por HIV-1 podría estar asociada a las alteraciones metabólicas inducidas por el virus.Como objetivo se pretende analizar la expresión, la actividad y la función de HIF-1α en células T CD4 + infectadas con HIV-1.Métodos: Las células T CD4 + aisladas de sangre de donantes sanos se activaron con anticuerpos anti-CD3/CD28 y se infectaron in vitro con HIV-1. Se evaluó la actividad de HIF-1α utilizando una línea celular reportera, que expresa GFP bajo el control del Elemento de Respuesta a Hipoxia (HRE). La producción de citocinas se evaluó mediante el kit CBA. La viabilidad celular se evaluó mediante tinción con 7-AAD y unión a Anexina V. El silenciamiento de la expresión de HIF-1α se logró mediante transducción con lentivirus que codifican shRNAs específicos. Para analizar ex vivo la relación entre los niveles de HIF-1 α y la muerte celular en células T CD4 + un total de 23 pacientes infectados por HIV en tratamiento antirretroviral (cART) y 6 donantes sanos fueron reclutados. Resultados: Demostramos que la infección por HIV-1 desencadena la expresión y actividad de HIF-1α, promoviendo glicolisis aeróbica y la producción de citoquinas proinflamatorias en células T CD4 + infectadas in vitro. También se observó que la promoción de glicolisis aeróbica por HIV-1 se asocia con una mayor tasa de muerte de células T CD4 +. Sorprendentemente, silenciar la expresión de HIF-1α en células T CD4 + revertió la promoción de la muerte celular y la producción de citocinas proinflamatorias inducidas por la infección con HIV-1. Finalmente, también analizamos la expresión de HIF-1α en muestras de pacientes infectados con HIV-1 en cART. Curiosamente, estos pacientes también muestran mayores niveles de HIF-1α en comparación con donantes sanos. Además, los niveles de expresión de este factor de transcripción presentaron una correlación negativa con el recuento de células T CD4 +.Conclusiones: En conclusión, mostramos que la infección por HIV-1 induce la actividad de HIF-1α en células productivamente infectadas que promueven la actividad glicolítica, un fenotipo proinflamatorio y la muerte celular. Estos resultados aportan conocimiento para encontrar nuevos blancos terapéuticos basados en el metabolismos celular, y finalmente poder restaurar la funcionalidad de las células T CD4 + en individuos infectados con HIV-1.