INDUCCIÓN DE LA APOPTOSIS EN HEPATOCITOS HUMANOS POR LA REPLICACIÓN DEL VIRUS DE LA HEPATITIS B DEL SUBGENOTIPO AUTÓCTONO LATINOAMERICANO.

FLICHMAN D; ELIZALDE M; CAMPOS R; GONZÁLEZ LÓPEZ LEDESMA MM; BARBINI L; SEVIC I

Buenos Aires

Congreso; XIX Congreso Argentino de Hepatología; 2017

Sociedad Argentina de Hepatología

El virus de la hepatitis B (HBV) causa infecciones agudas y crónicas. El virus se clasifica en varios (sub)genotipos (sgts), los cuales poseen distintas características biológicas. En nuestro país, los sgts nativos americanos F1b y F4, son los de mayor circulación. El sgt F1b es el principal responsable de las nuevas infecciones agudas y crónicas. Entre las mutaciones de importancia clínica del HBV, las del BCP (aumentan la replicación viral e implican los cambios K130M/V131I en la proteína X) y del preC (impide la síntesis del HBeAg), han sido relacionadas a la patogenia en la infección crónica.Objetivos.Analizar si la replicación del HBV de los sgts F1b y F4 induce la apoptosis en células de hepatoma humano. Estudiar el efecto de las mutaciones BCP y preC en la modulación de este proceso.Metodología.Se transfectaron células Huh-7 con una mezcla de clones de genoma completo del HBV (sgts F1b y F4), con la secuencia wild type (wt) y con mutaciones en el BCP (A1762T/G1764A, T1753C/A1762T/G1764A/C1766T) y preC (G1896A). La muerte celular por apoptosis se evaluó mediante la tinción con naranja de acridina-bromuro de etidio y citometría de flujo.Resultados.La replicación viral del HBV de sgts F1b y F4 aumentó significativamente la muerte por apoptosis en relación al control, detectada por ambas metodologías. Además, se evidenció que las mutantes BCP (A1762T/G1764A) y preC (G1896A) indujeron un porcentaje significativamente mayor de apoptosis que el inducido por el virus wt, para ambos sgts. Por su parte, la mutante BCP (T1753C/A1762T/G1764A/C1766T), con mayor capacidad replicativa que el virus wt y la doble mutante BCP (A1762T/G1764A), indujo porcentajes de apoptosis similares a las otras mutantes, con respecto al control para ambos sgts.Conclusiones.La replicación del HBV de sgts F1b y F4 induce la apoptosis en hepatocitos humanos en cultivo. Las mutaciones en el BCP tienen un mayor efecto en la inducción de la apoptosis que el virus wt. Este aumento no estaría asociado a los niveles de replicación viral, sino que podría relacionarse con mutaciones en la proteína X. Además, la ausencia del HBeAg (mutante preC), también aumenta la apoptosis en relación al virus wt, sugiriendo que el HBeAg podría tener un efecto anti-apoptótico en estas células. Estos resultados contribuyen a describir los mecanismos de patogenia del HBV, y aportan a la caracterización del genotipo F, responsable de la mayoría de las infecciones por HBV en nuestra región.