AUMENTO DE LA PROPAGACIÓN DEL VIH-1 MEDIANTE LA INTERACCIÓN MIF / CD74 EN MACRÓFAGOS DERIVADOS DE MONOCITOS PRIMARIOS (MDM) Y LINFOCITOS T CD4 + (TLCD4) IN VITRO

SALIDO JIMENA; GHIGLIONE YANINA; SALOMÓN HORACIO; TURK GABRIELA; TRIFONE CESAR; QUIROGA FLORENCIA

Buenos Aires

Congreso; XI I Congreso Argentino de Virología; 2017

Sociedad Argentina de Virologia

Antecedentes: La comprensión de los mecanismos implicados enla infección por VIH-1 aportaría evidencia para la identificación de posiblesnuevos blancos terapéuticos para controlar la infección frente a laslimitaciones de la TARV. La expresión en la membrana plasmática de CD74 estáregulada positivamente en las células infectadas durante la infección por VIH-1,en respuesta a la expresión de la proteína viral NEF. Gracias a un trabajo denuestro grupo, se correlacionó la expresión de CD74 en membrana con lahiperactivación inmune en individuos infectados con VIH. Adicionalmente, elnivel plasmático de MIF (Factor Inhibidor de Migración de Macrófagos), elligando activador de CD74, aumenta en sujetos infectados respecto a individuossanos. Sin embargo, el papel desempeñado por la interacción MIF/CD74 en lapatogénesis del VIH sigue siendo un campo inexplorado. Objetivo: estudiar el efecto de la interacción MIF/CD74 enmacrófagos derivados de monocitos primarios infectados con VIH (MDM) ylinfocitos T CD4 + (LTCD4).Métodos: Se obtuvieron TLCD4 y MDMs de donantes sanos. LosMDM se infectaron con HIV-1 de tropismo R5 y se estimularon con concentracionesde MIF que oscilaban entre 1 y 25 ng/ml. Se midieron la producción de citoquinaspor ELISA y la expresión del receptor Toll-like 4 (TLR4) por citometría deflujo. Los TLCD4 primarios se trataron con sobrenadantes MDMs o citoquinasexógenas para evaluar su permisividad a la infección por VIH-1 con tropismo X4,mediante la cuantificación de p24 por ELISA en los sobrenadantes de cultivo. Elanálisis de los datos se realizó por métodos paramétricos.Resultados: El tratamiento de MDM infectados con MIF diocomo resultado un aumento dosis dependiente de la producción de IL-6, IL-8, TNFα, IL-1β eICAMs (p<0,05; p<0,01, p<0,05, p<0.05, p<0.05, respectivamente)en comparación con las células no tratadas. Mediante el uso de un anticuerpo αCD74,se impedía la interacción MIF/CD74 y estos efectos fueron revertidos, exceptoen los casos de ICAMs. El tratamiento de TLCD4 quiescente con sobrenadantes decultivo derivado de MDM tratados con MIF condujo a un aumento de la producciónde la proteína viral p24, manifestad como un aumento de 2 veces en comparaciónal control. Este efecto se recapituló mediante adición exógena de IL-6, IL-8,IL1β y TNFα.Nuevamente, el uso del anticuerpo αCD74 en los MDMs ocasionaba la perdidade este efecto, en este caso sobre la infección de TLCD4 por VIH-1. Por otrolado, el estímulo con MIF indujo una mayor producción de progenie viral, en estasmismas células, medida como la concentración de la proteína viral p24 en elsobrenadante de cultivo de una manera dosis dependiente. Conclusiones: Estos hallazgos indican que la interacciónMIF/CD74 en MDM infectados contribuye a la generación de un microambienteinflamatorio. Este efecto aumenta la replicación viral y la propagación del VIHen TLCD4 primarios. El efecto directo de la citoquina MIF sobre esta estirpecelular también tenía un efecto potenciador de la producción de progenie viral.En conclusión, esta evidencia nos permite postular un papel novedoso para eleje MIF/CD74 en la patogénesis del VIH.