306 - EL CONTENIDO DE LA VESÍCULA SEMINAL AUMENTA LA EFICACIA DE LA VACUNACIÓN INTRAVAGINAL CON HSV-2

REMES LENICOV FEDERICO; CEBALLOS ANA; AUGUSTO VARESE; PALLETA ANA; FEDERICO REMES LENICOV, MELINA GONZALEZ PRINZ, AUGUSTO VARESE, JORGE GEFFNER, ANA CEBALLOS

Congreso; CONGRESO ARGENTINO DE VIROLOGÍA; 2017

El semen es el principal vector de una amplia gama deenfermedades de transmisión sexual. Además, es capaz de inducir accionesinmunosupresoras que favorecen la tolerancia alo-reactiva a antígenos paternos,evitando el rechazo fetal luego de la implantación. Nuestra hipótesis es que elsemen, más allá de ser un vehículo de agentes infecciosos, tiene la capacidadde modular la respuesta inmune contra patógenos de transmisión sexual.Para analizar el efecto del semen en el contexto de latransmisión sexual de un patógeno, ensayamos un modelo murino de vacunaciónintravaginal con HSV-2. Hembras Balb/c fueron vacunadas con HSV-2 inactivado (1x104UFP) por vía intravaginal en presencia o no del fluido que contienen lasvesículas seminales (VS), extraído de machos singeneicos. Un mes después fuerondesafiadas por la misma vía con una dosis letal de HSV-2 (3x106 UFP)(n=10 por grupo). Se evaluó: la producción de citoquinas por ELISA, laexpresión de CD3, CD8, CD4, CD62L, CD44, CD11c, CMHII, CD86, la producción deIFN-γ y la proliferación celular (pérdida de CFSE) por citometría de flujo. Al vacunar a los ratones en presencia de VS observamosuna supervivencia del 80% al desafío letal, en comparación al 20% de losratones vacunados sin VS o de los ratones inoculados con VS en ausencia de lavacuna (p=0,014). Encontramos el mismo efecto al analizar el progreso de laenfermedad o la pérdida de peso asociada a la infección (p<0,05). Alanalizar la respuesta inmune frente al desafío, descubrimos que los vacunadosen presencia de VS mostraron células T CD4+ y CD8+ con mayor proliferación(p<0,05)  y producción de IFN-γ en losganglios drenantes de la mucosa genital (GDs) (p<0.01) y en la mucosa (p<0,05)frente estímulos específicos. Además en el sitio de infección, se observó uninfiltrado de células T CD8+ (p<0,05), y un aumento de IFN-γ en lavadosvaginales (p<0,05). Cuando analizamos la respuesta inmune previa al desafío,caracterizamos un aumento en el número y la funcionalidad en las poblaciones decélulas de memoria TCD4+ y CD8+ (p<0,05). Para probar la importancia de larespuesta de memoria celular en nuestro modelo, aislamos células TCD4+ y CD8+ ylas transferimos a ratones sin vacunar para luego desafiarlos. Los ratones querecibieron células T de ratones vacunados en presencia de VS demostraron unamenor progresión de la enfermedad (p<0,05) y menor mortalidad (p=0.011). Finalmente,evaluamos la respuesta inmune a tiempos tempranos post-vacunación, y observamosque al vacunar en presencia de VS aumentaba IFN-γ, IL-6 y TNF-α en GDs y lamucosa (p<0,05). En cuanto a las células dendríticas, encontramos mayorexpresión de marcadores de maduración en las células CD11c+MHCII+ de vagina(p<0,05) y en GDs encontramos mayor proporción de estas células (p<0,05).Nuestros resultados sugieren que VS actúa como unadyuvante que promueve una respuesta inflamatoria temprana, que repercute en lainducción de una potente respuesta de memoria celular.