Cuantificación por LC-MS-MS (ESI-QQQ) de Dehidroepiandrosterona y sus metabolitos en plasma humano en pacientes sanos y coinfectados con MTB/HIV

MARÍA BELÉN VECCHIONE; MATÍAS ANGERAMI; GUADALUPE SUÁREZ; MARÍA FLORENCIA QUIROGA ; ANDREA C. BRUTTOMESSO

Congreso; XX Simposio Nacional de Química Orgánica, Sociedad Argentina de Investigación en Química Orgánica.; 2015

XX Simposio Nacional de Química Orgánica, Sociedad Argentina de Investigación en Química Orgánica.

Mycobacterium tuberculosis (Mtb) es un patógeno intracelular que causa más deun millón de muertes por año. La coinfección con el Virus de la Inmunodeficiencia Humana (HIV) acelera y agrava ambas infecciones, siendo la tuberculosis (TB) la principal causa de muerte en pacientes con HIV.Nuestros resultados previos sugieren que dehidroepiandrosterona (DHEA), una hormona secretada por la glándula adrenal, es capaz de modular la respuesta inmune contra Mtb durante la coinfección.Por otra parte, ha sido propuesto que DHEA tal vez no sea la sustancia activa que regule todos los procesos, sino que sus metabolitos podrían tener un rol esencial. Por ello, nos propusimos cuantificar DHEA, y sus metabolitos androstenediol (AED), androstenetriol (AET) y 7-oxo-DHEA en dadores sanos y pacientes coinfectados con TB-HIV-1, como parte de nuestro estudio sobre la capacidad inmunomoduladora de estos esteroides.El desarrollo de métodos analíticos sensibles y selectivos para la cuantificación de compuestos que se encuentran en bajas concentraciones, es esencial para dilucidar sus roles y funciones biológicas en los sistemas vivos. La cromatografía líquida asociada a la espectrometría de masas con tecnología de triple cuadrupolo y equipada con electrospray como método de ionización (LC / ESI/ MS-QQQ), es una de las técnicasanalíticas más utilizadas para este propósito en matrices complejas.Los esteroides AED,AET y 7-oxo-DHEA se sintetizaron a partir de DHEA. Se prepararon diluciones seriadas para la optimización de los parámetros en el módulo de masas, obteniendo las transiciones (SRMs) en el modo ESI-positivo y se determinaron los límites de detección (LOD) y cuantificación (LOQ).A partir de las sintonizaciones previas de los compuestos, se realizó una curva de calibración con matriz y se procedió a la determinación de dichos compuestos en muestras de plasma de dadores sanos y coinfectados. Los esteroides DHEA y 7-oxo-DHEA se encontraron en menor concentración en los pacientes coinfectados.