Regulación hormonal en co-cultivo de líneas celulares estromal y epitelial derivadas de un carcinoma progestágeno-dependiente

CAROLINE LAMB; VICTORIA FABRIS; LUISA HELGUERO; ALEJO EFEYAN; MARINA SIMIAN; NORBERTO SANJUAN; ALFREDO MOLINOLO; CLAUDIA LANARI

Mar del Plata, Buenos Aires, Argentina

Congreso; XLVII Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2002

De un cultivo primario de un carcinoma mamario murino progestágeno-dependiente generamos dos líneas celulares. MC4-L4E, de morfología típicamente epitelial, fue clonada por dilución límite; MC4-L4F, de crecimiento fusiforme, se seleccionó por pegado diferencial. MC4-L4F es citoqueratina negativa y muestra características mesenquimáticas poco diferenciadas por microscopía electrónica. Expresa receptores de estrógeno (RE), pero no de progesterona (RP) y es estimulada por TGFbeta o EGF (Ej. índice de incorporación de 3H-timidina, Control: 1 +/-0.27; TGFbeta (1 ng/ml): 2.63 +/- 0.25, p<0.001). In vitro diferencia a liploblastos (por estimulación con isobutilmetilxantina, dexametasona e insulina), no forma colonias en agar blando y no es tumorigénica. MC4-L4E es epitelial (citoqueratina positiva), se inhibe con el agregado de TGFbeta (Ej: Control: 1 +/- 0.21; TGFbeta (1 ng/ml): 0.26 +/- 0.15, p<0.001). Es tumorigénica en hembras BALB/c; origina carcinomas ductales que expresan RE y RP y son metastásicos en pulmón. Se inhibe con 17-beta-estradiol (E[2]) y regresiona con RU486 (p<0.001). En co-cultivo de ambas líneas se observó un efecto sinérgico en la incorporación de 3H-timidina (Ej: MC4-L4F: 1 +/- 0.41; MC4-L4E: 0.90 +/- 0.214; F+C: 4.86 +/- 01.22, p<0.001), que fue mayor en presencia de (E[2]) (p<0.001). Describimos un modelo para el estudio in vitro de relaciones epitelio-estroma tumoral. Estos resultados jerarquizan el rol del estroma tumoral en la respuesta a hormonas.