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La sarcopenia, patología que provoca la pérdida de masa y fuerza del músculo esquelético en la adultez, ha sido asociada al déficit de hormonas sexuales, como los andrógenos y estrógenos. Los estudios a nivel molecular indican que la apoptosis podría ser el mecanismo responsable de la pérdida de miocitos contribuyendo a su patogénesis. En el músculo, la principal fuente de mionúcleos adicionales para el crecimiento muscular lo proporcionan un número residual de mioblastos que escapan al desarrollo y persisten como "células satélites". La línea de músculo esquelético murino C2C12 empleada en este trabajo, en estado proliferativo, es equivalente a las "células satélites" activadas que rodean a las fibras musculares. Algunos trabajos previos de nuestro grupo demostraron que durante la apoptosis, las células musculares C2C12 responden de manera bifásica al agente apoptótico H2O2 culminando, finalmente, en el proceso de muerte celular programada. La testosterona, en concentración fisiológica, protege a las células de este evento en distintos niveles: morfológico, fisiológico, bioquímico y molecular. En este trabajo se evaluaron algunos de los componentes upstream de las rutas de señalización clásicas de la apoptosis, que actuarían o no como factores de transcripción y que podrían desencadenar, finalmente, la respuesta apoptótica. En paralelo, se evaluó el papel de la testosterona durante la activación de estas señales. Finalmente se determinaron los niveles de expresión de genes relacionados con eventos proapoptóticos y antiapoptóticos y la capacidad de la hormona de regularlos. Observamos por Western blot e inmunocitoquímica, que el estrés oxidativo provocado por la exposición al H2O2, induce en C2C12, la activación de p53 de manera tiempo-dependiente, con un nivel máximo de fosforilación a la 1-2 horas de tratamiento. La activación de p53, inducida por el H2O2, es reducida por el tratamiento previo con testosterona. Una de las formas con que p53 induce apoptosis es mediante la regulación positiva de la expresión de p66Shc, una proteína adaptadora que amplifica la generación de H2O2 mitocondrial. Nuestros trabajos demostraron que el tratamiento hormonal previo al estímulo apoptótico reduce los niveles de activación de p66Shc y su localización mitocondrial inducidos por el H2O2. En paralelo, la testosterona redujo la activación de JNK inducida por el H2O2. JNK estaría actuando como un activador de p66Shc, debido a que el tratamiento previo con un inhibidor de la quinasa reduce casi por completo la activación, en presencia de H2O2, no solo de JNK sino también de p66Shc. Finalmente, por ensayos de PCR en tiempo real, se determinaron los niveles de ARN mensajeros de genes proapoptóticos y antiapoptóticos, luego del tratamiento a distintos tiempos con H2O2 evaluándose también, el efecto del tratamiento hormonal previo al estímulo oxidativo. Se demostró que la hormona es capaz de reducir el efecto del H2O2 sobre la regulación de los niveles de ARN mensajero de los genes evaluados. La hormona favorecería, entonces, la expresión de genes relacionados con la supervivencia respecto de aquellos genes apoptóticos y antiproliferativos, ejerciendo de esta manera su efecto protectivo a nivel de la expresión génica.

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