INBIOTEC   24408
INSTITUTO DE INVESTIGACIONES EN BIODIVERSIDAD Y BIOTECNOLOGIA
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
IDENTIFICACIÓN DE NEMATODOS EN POBLACIONES DE MOSQUITOS EN CRIADEROS NATURALES DE MAR DEL PLATA
Autor/es:
LÓPEZ R; DÍAZ NIERO LM; BERÓN CM
Lugar:
Resistencia
Reunión:
Jornada; IX JORNADAS REGIONALES DE MOSQUITOS; 2014
Resumen:
La incorporación de agentes biológicos para la eliminación de las poblaciones de mosquitos vectores constituye una alternativa de control segura para el medio ambiente. En ese sentido, los nematodos parásitos de culícidos pertenecientes a la familia Mermithidae resultan una alternativa promisoria, ya que cohabitan en criaderos naturales de mosquitos, cumpliendo una parte de su ciclo de vida dentro de los estadios larvales de estos dípteros. En su fase parásita los nematodos se alimentan y desarrollan, emergiendo como juveniles postparásitos en cuarto estadio, llegando al estado adulto en el medio externo, donde se entierran en el sustrato para copular y poner los huevos que eclosionan al inundarse los criaderos. Los mermítidos resultan letales para su hospedador y han sido aislados en un amplio rango de especies de mosquitos. El objetivo de este trabajo fue identificar nematodos parásitos de larvas de mosquitos detectados en relevamientos anteriores y determinar su patogenicidad en el laboratorio. Durante los años 2009 al 2013 se realizó el relevamiento de especies de mosquitos en Mar del Plata y alrededores, detectando insectos parasitados en algunos charcos de inundación temporaria provocados por lluvias sucesivas. Durante el verano 2013-2014 se colectaron ejemplares de diferentes larvas de mosquitos portadores de estos parásitos, desarrollados en dos criaderos sobre la Ruta Provincial No 2. Los insectos fueron transportados al laboratorio y criados hasta estadio de larva IV. Una vez alcanzado este estadio larval, los diferentes ejemplares fueron identificados por medio de sus caracteres morfológicos de importancia taxonómica y posteriormente fueron disectados para confirmar la presencia de nematodos en su interior. Las larvas de mosquito se separaron individualmente para la obtención de los juveniles postparásitos y se criaron hasta el estado adulto para su identificación morfológica. Los organismos analizados mostraron los rasgos morfológicos distintivos de Strelkovimermis spiculatus (Poinar & Camino, 1986): cutícula lisa, cabeza homocefálica redondeada con seis papilas cefálicas ordenadas en un solo plano; boca con dirección ventral pero no al nivel de la papila anterior, anfidios de tamaño medio con forma de botella con apertura dorsal y al mismo nivel que la papila lateral cefálica, tubo faríngeo extendido entre 1/3 y 1/5 del total del largo del cuerpo; vulva de apertura elíptica sin solapa; vagina de forma sigmoidal, doblada en la parte anterior; espículas pares ligeramente unidas y fusionadas en la punta; juveniles postparásitos con presencia de apéndice caudal. Los mosquitos parasitados a campo por este nematodo correspondieron a larvas de Ochlerotatus albifasciatus, Oc. crinifer y Culex eduardoi. La identificación molecular de los nematodos se realizó por extracción de DNA genómico total y posterior amplificación de la región correspondiente a genes ribosomales eucarióticos. Las secuencias nucleotídicas parciales obtenidas correspondientes a un fragmento del gen 18S RNAr fueron analizadas por alineamientos múltiples mediante el programa BLAST comparando con secuencias disponibles en la base de datos del National Center for Biotechnology Information (NCBI). Uno de los fragmentos nucleotídicos analizados mostró una identidad del 100 % al ser comparada con una secuencia parcial del gen 18S RNAr de S. spiculatus disponible en la base de datos. Para determinar la patogenicidad de estos nematodos contra larvas de Culex pipiens provenientes de colonias mantenidas en laboratorio, se realizaron ensayos preliminares a partir de ejemplares de estos mermítidos aislados en el laboratorio a partir de larvas de Oc. albifasciatus infectadas a campo. Un ?cluster? de cópula con 20 individuos de estos nematodes fueron criados en vasos con 100 mL de agua desclorada hasta obtener juveniles infectantes, 20 días después fueron incorporadas 10 larvas de segundo estadio de C. pipiens. Al llegar al cuarto estadio los insectos fueron observados bajo microscopio estereoscópico determinando el 100 % de infección y una mortalidad del 100 % en las larvas analizadas. En este trabajo se reporta por primera vez la presencia de S. spiculatus en criaderos naturales de mosquitos en la ciudad de Mar del Plata. La infección de larvas de C. eduardoi por este nematodo constituye el primer registro para esta especie de mosquito. La mortalidad de larvas de C. pipiens determinada en el laboratorio y la presencia en el campo en tres especies de mosquitos parasitadas, nos permite hipotetizar que S. spiculatus podría estar ejerciendo un efecto bioregulador sobre la densidad de estos mosquitos confirmando que puede ser un agente de control biológico a ser usado en programas de manejo integrado para el control de vectores de importancia sanitaria.