COMUNICACIÓN EXTRACELULAR MEDIADA POR EXOSOMAS EN CEPAS RESISTENTES DE Giardia lamblia

LUNA PIZARRO GABRIEL; FELIZIANI, CONSTANZA; RÓPOLO, ANDREA; TOUZ, MARÍA CAROLINA

Jornada; XXIII Jornadas Científicas de la Sociedad de Biología de Cordoba; 2022

El protozoario intestinal Giardia lamblia es el agente causal de la parasitosis conocida como giardiasis, la cual ha sido catalogada porla Organización Mundial de la Salud como una enfermedad desatendida y afecta principalmente a los países en vías de desarrollo puesestá estrechamente relacionada con la pobreza, malnutrición y escasa educación higiénico sanitaria. Por su parte, la aparición de cepasresistentes para las cuales el abanico terapéutico se acota enormemente, agrava aún más la problemática. La generación de resistenciapuede ocurrir de forma espontánea en pacientes, pero también se pueden producir in vitro aumentando gradualmente la concentraciónde la droga a la cual se exponen las células. La relación entre los mecanismos de comunicación extracelular mediado por vesículasextracelulares (ej. microvesículas y exosomas) y la resistencia a drogas está siendo profundamente estudiada. Por ejemplo, en célulastumorales se ha descrito que la comunicación extracelular mediada por exosomas es capaz de gatillar la adquisición de resistencia adiferentes fármacos antineoplásicos. Es por ello, que nos preguntamos si este mecanismo de adquisición de resistencia también podríaestar ocurriendo en G. lamblia. Inicialmente, se evaluó si la comunicación mediante exosomas ocurre en este protozoario. Para ello, seaislaron exosomas de las cepas WB/1267 y GS/H7 salvajes mediante filtración y ultracentrifugación para luego marcarlos con BODIPYFL-C5-ceramide fluorescente que se incorpora a la membrana de los exosomas. Los exosomas aislados y marcados fueron incubadoscon trofozoítos y su internalización a diferentes tiempos se observó mediante fluorescencia y microscopía confocal. Para evaluar siocurría lo mismo entre cepas resistentes a metronidazol (MTZ), la droga de referencia para el tratamiento de la giardiasis, se generaronin vitro cepas de WB y GS resistentes a metronidazol (MTZ), alcanzando una resistencia a concentraciones de MTZ de 9,0 y 7,7 μMrespectivamente. Luego, se realizó el ensayo de marcado e internalización de los exosomas aislados de cepas resistentes WBmtz9.0 yGSmtz7.7, que fueron incubados con trofozoítos salvajes WB y GS. Los resultados, mostraron por primera vez que la comunicaciónextracelular mediada por exosomas ocurre en G. lamblia entre cepas salvajes y cepas resistentes a MTZ e incluso entre cepas diferentes.Resta indagar si dicha comunicación es capaz de otorgar algún tipo de resistencia a las células receptoras y, de ocurrir, evaluar en quémedida. Conocer los mecanismos involucrados en la adquisición de resistencia a las drogas antimicrobianas en parásitos endémicosresulta muy importante para la salud pública.