Efecto del óxido nítrico en la nefropatía obstructiva

LUCIANA MAZZEI; JUAN PABLO CALVO; MARIANA CASAROTTO; ISABEL MERCEDES GARCÍA; MIGUEL FORNÉS; DARÍO CUELLO-CARRIÓN; LEÓN FERDER; WALTER MANUCHA

Mendoza

Jornada; XXIV JORNADAS DE INVESTIGACIÓN Y VI JORNADAS DE POSGRADO DE LA UNIVERSIDAD NACIONAL DE CUYO; 2015

Secretaría de Ciencia, Técnica y Postgrado de la Universidad Nacional de Cuyo

Una de las principales características de la lesión sufrida por el riñón durante la obstrucción es la profunda inducción apoptótica en el epitelio tubular. Después de 14 días de obstrucción, el óxido nítrico (ON) endógeno se reduce considerablemente. Por otro lado, se ha informado que el aumento de la disponibilidad de ON podría ser beneficioso en el alivio de la obstrucción ureteral unilateral (OUU). Objetivo: Evaluar el efecto del ON sobre: 1) apoptosis y fibrosis en riñones de ratas neonatas con OUU. 2) apoptosis en respuesta a deformación mecánica de células NRK52E. Metodologías: Ratas neonatas sometidas a OUU y controles fueron tratadas diariamente con L-NAME (50mg/kg/día), L-arginina (L-Arg, 100mg/kg/día) o vehículo durante 14 días. Se nefrectomizaron y se evaluó expresión de genes relacionados a la apoptosis y fibrosis por RT-PCR y Western Blot. Células NRK52E fueron expuestas por 48 horas a deformación mecánica graduada utilizando el sistema Flexcell en presencia o ausencia de L-NAME (1mM), L-Arg (1mM), nitroprusiato de sodio (NPS, 0,2mM) o combinaciones y se evaluó luego la apoptosis por citometría de flujo con Annexina V/Ioduro de propidio. Resultados: La expresión de genes nefrogénicos y citoprotectores disminuyó en la obstrucción y con el uso de L-NAME pero se mantuvo con respecto a los controles con L-Arg. Las células tratadas con L-Arg o NPS y la combinación de ambos mostraron una reducción en la apoptosis incluso en las células control sin estrés. Los tratamientos con L-NAME y L-NAME/L-Arg aumentaron la apoptosis en los grupos con deformación mecánica, pero no en los controles. Concluimos que la disponibilidad de ON protege contra la apoptosis durante la lesión obstructiva.