Obstrucción Ureteral Unilateral Neonatal : Rol de Caspasa-3 en la Inducción a la Apoptosis

CELESTE RUETE; LILIANA CARRIZO; WALTER MANUCHA; PATRICIA G. VALLES

Facultad de Medicina U. N. de Cuyo - Mendoza

Jornada; VIII Jornadas de Investigación Facultad de Ciencias Médicas U.N. de Cuyo; 2005

Secretaría de Ciencia y Técnica Facultad de Ciencias Médicas U. N. de Cuyo

La obstrucción ureteral unilateral (OUU) está caracterizada por un defecto en el crecimiento y en el desarrollo del riñón con reducción en el número de nefronas. La obstrucción prolongada conduce a la atrofia tubular y pérdida de tejido en el riñón. En ratas en período neonatal hay un incremento de la apoptosis a nivel tubular. Los eventos moleculares que conducen a la apoptosis en la obstrucción aún no han sido totalmente aclarados. Se sabe que existen dos vías de señalización que conducen a la apoptosis,una independiente y otra dependiente de las caspasas. En esta última, las señales que conducen a la apoptosis son activadas por estímulos internos o externos, siendo la transducción de la señal al núcleo conducida por la vía de las caspasas. El objetivo del presente trabajo fue estudiar si la apoptosis inducida en el modelo de obstrucción renal, está mediada por la vía de señalización de las caspasas. Ratas Wistar hembras fueron sometidas a una obstrucción del uréter izquierdo (n=8) dentro de las primeras 48 horas de vida. Luego de 5 y 14 días de obstrucción se realizó una nefrectomía bilateral. La identificación de las células apoptóticas (AC) se llevó a cabo por la técnica de TUNEL, y para la cuantificación de las mismas se utilizó un analizador de imágenes tomando un área de 0.75mm2. El número de células apoptóticas fue expresado como AC/mm± SEM. La expresión de Caspasa-3 fue evaluada por Western Blotting e inmunohistoquímica. La cuantificación de células apoptóticas mostró un incremento significativo en la corteza luego de 14 días de obstrucci6n respecto de la corteza control (141± 62 vs. 7 ± 4.04, p<0.01). La expresión de la proenzima de 32 kDa mostró un incremento significativo en la corteza obstruida luego de 5 días respecto de la corteza control ( 96±2.9 vs. 190 ± 4.5, p<0.05). Por otro lado, en las ratas obstruídas por días se observó un descenso en la procaspasa respecto del control.