OBSTRUCCIÓN URETERAL NEONATAL: ROL DE ÓXIDO NÍTRICO EN LA INDUCCIÓN A APOPTOSIS

WALTER MANUCHA; CELESTE RUETE; LILIANA CARRIZO; MARCELO RODRIGUEZ PEÑA; PATRICIA G. VALLES

Mar del Plata - Buenos Aires - Argentina

Congreso; XXVI Reunión Anual del Consejo Argentino de Hipertensión Arterial; 2005

Sociedad Argentina de Cardiología y Consejo Argentino de Hipertensión Arterial

La nefropatía obstructiva congénita conduce a apoptosis y posterior atrofia tubular. Numerosos factores han sido implicados en la inducción a apoptosis (angiotensina II, TGF-b, citokinas, COX-2 y el estrés oxidativo) en obstrucción. Existen crecientes evidencias sobre la regulación de la vía apoptótica mediada por la disponibilidad de óxido nítrico (ON). Objetivo: Estudiar los mecanismos relacionados a la citoprotección ON dependiente y su relación con las señales apoptóticas intracelulares y mitocondriales en el modelo de obstrucción ureteral neonatal. Material y Método: Ratas Wistar (n=12) de 48 hs fueron obstruidas en ureter izquierdo durante 5 y 14 días. Metodología realizada en cortezas obstruidas (CO) y controles (CC): l)-RT-PCR (AT1, AT2, iNOS, TGF-b, BcL2 y Bax). 2)-Westem Blot (procaspasa 3, p53 Y COX-2). 3)-Actividad         de caspasa 3 por fluorometría. 4)-ON endógeno por espectrofotometría. 5)-Parámetros oxidativos (SOD, anión superóxido) y Apoptosis por TUNEL. Resultados: Se observó en condiciones basales aumento del ARNm de AT1 con descenso de AT2, en CO (día 14) persistencia de los niveles de AT2. Descenso de ON endógeno en día 14 en CO vs. CC, (5±1 vs. 21±2, p<0.0l), con descenso del índice iNOS/TGF-b referido a CO de 5 días: (0.50±0.04 vs. O.85±0.05 p<0.01) asociado a incremento de apoptosis en CO (5±0.5 vs 0.56±0.1, p<0.01), fue demostrado. Disminución significativa de la expresión de procaspasa 3 (CO vs. CC, indetectable vs. 1.03±0.05, p<0.01, día 14) con aumento de actividad caspasa 3 (CO vs. CC, 205±23 vs. 126±15, p<0.01) así como la relación proapoptótica Bax/BcL2 (CO vs. CC, 1.43±0.04 vs. 0.84±0.06, p<0.01) fue demostrada. Incremento significativo de p53 (fracción nuclear) fue demostrado en el mismo período (CO vs. CC, 1,55±0.04 vs. 0.2±0.05, p<0.01). Incremento de ERO con disminución del poder antioxidante total y actividad SOD fue mostrado en CO vs. CC (día 14). La expresión de COX-2 disminuyó significativamente en el día 14 de         obstrucción (CO vs. CC, 30±6 vs. 110±16, p<0.01).                                                                                            . CONCLUSION: Sugerimos que la disminución en la biodisponibilidad del ON intracelular podría estar involucrada en la marcada apoptosis durante la obstrucción ureteral neonatal. El incremento de la expresión de p53 y TGF-B podrían contribuir a disminuir la expresión de iNOS,   COX-2 y BcL2, involucrados en la inhibición de la apoptosis.