ESTABILIZACIÓN DE LA Na+/K+-ATPASA POR HSP70 EN OMCD DURANTE LA RECUPERACIÓN POST DIETA HIPOPROTEICA

CELESTE RUETE; LILIANA CARRIZO; WALTER MANUCHA; PATRICIA G. VALLES

Mar del Plata - Buenos Aires - Argentina

Congreso; Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2006

Sociedad Argentina de Investigación Clínica

La injuria renal por isquemia inducida por deprivación proteica compromete a las células de la médula externa (Vallés y col. Nephron PhysioI99(3):90-100, 2005). Estudios previos indican que sobre-expresión de HSP70 disminuye la disociación de Na+/K+­ATPasa (NKA) del citoesqueleto luego de la injuria por isquemia. El objetivo de este trabajo fue estudiar los niveles en el ciloesqueleto de NKA en el modelo de dieta pobre en proteínas y su interacción con HSP70 durante la recuperación proteica. Materiales y Métodos: Ratas wistar hembras (n=8) destetadas, tres gru­pos: normoproteica por 14 días (24%, NP), hipoproteica (8%. LP) por 14 días y recuperación 14 días con 8% mas 14 días con 24% (RP). Las muestras se homogeneizaron en buffer con 0.1% de Tritón. Se analizaron los niveles de NKA y HSP70 por western blot. Se realizó coinmunoprecipitación de las proteínas. La actividad de NKA se midió en túbulos microdisecados, colectores corticales (CCD) y de la médula externa (OMCD). Resultados: Se observó aumento en la disociación de NKA en la fracción soluble como resultado de la dieta hipoproteica vs. control (196.5±4.5 vs. 151±5, p< 0.05). Mientras que disminuyó la HSP70 en esta misma fracción de ratas desnutridas (179.3±0.5 vs. 224.7±85. p<0.05). La actividad de la NKA se redujo como resultado de la deprivación proteica vs. control (CCD, 42±1.2 vs. 67±1.5; OMCD, 24±1.3 vs. 66±0.90. p<0.05). Se observó la translocación de la HSP70 a la fracción de citoesqueleto injuriada por desnutrición y un aumento en la disociación de NKA por inhibición in vjtro de la HSP70. La disociación de NKA fue revertida luego de la recuperación con incremento en los niveles de HSP70 en la fracción no asociada al cjtoesquelelo. Conclusiones: El aumento en la disociación de la NI<A del citoesquelelo por desnutrición se revirtió in vivo asociado al aumento de HSP70, sugiriendo la participación de esta chaperona en la estabilización del citoesqueleto luego de recuperación proteica.