Estrategia metabolómica no dirigida para estudiar el efecto de la ingesta de compuestos bioactivos provenientes de matrices vegetales

DANIELA RAMIREZ; ROBERTO BAFUMO; WALTER MANUCHA; ALEJANDRA CAMARGO

San Juan

Congreso; XII Congreso Argentino de Química Analítica; 2023

La metabolómica, como herramienta analítica, ofrece una visión holística de gran cantidad de datos biológicos. Así puede utilizarse este tipo de estudios para analizar los cambios producidos en el organismo luego del consumo de alimentos, y a su vez determinar marcadores químicos que nos den un indicio del camino recorrido por los compuestos bioactivos originales1. Siguiendo estos preceptos, se desarrollaron tareas en colaboración con el Grupo de Ingredientes Bioactivos (Depto. Qca. Analítica, UGR) para abordar de manera crítica el destino fisiológico de compuestos bioactivos asociados a micro-hortalizas de Brásicas con gran potencial funcional, mediante un enfoque metabolómico no dirigido y quimiométrico. Para ello se trabajó sobre la caracterización metabolómica tanto de la matriz vegetal -muestras de hortalizas de coliflor -Brassica oleracea var. Botrytis- como de sus productos metabolizados en diferentes muestras biológicas (plasma yorina). Para el estudio de intervención dietaria se empleó un modelo de ratas de laboratorio -n=6-, aplicando una dieta con 5% de dosis de micro-hortalizas liofilizadas incorporadas a la alimentación normal de los animales durante 24 hs o durante 4 semanas, comparando frente a grupos control con dieta sin intervención. Todas las muestras fueron analizadas empleando cromatografía en Fase Reversa, mediante UHPLC-ESI-QTOF. La detección de las masas se hizo tanto en modo de ionización negativo como positivo abarcando un rango de 50 a 1500 m/z. Los metabolomas fueron luego procesados según Klåvus et al., 20202, empleando MZmine versión 2.53 para selección de masas, alineamiento y agrupación. Posteriormente se empleó el paquete “NOTAME (v 0.1.2)” de R para filtrar señales contaminantes y con baja calidad, normalizar señales y visualizar datos para su posterior análisis estadístico multivariado. De las muestras vegetales se ha logrado avanzar en la anotación de 38 analitos, incluidos glucosinolatos alifáticos e indólicos y diversos compuestos fenólicos. En las muestras biológicas, análisis multivariados de tipo de PLS-DA y Fold-change permitieron clasificar los tres grupos de animales (control, tratadas aguda y tratadas crónica), encontrando más de 50 señales discriminantes (VIP score mayor a 2.5), de las cuales han podido anotarse compuestos con importantes funciones antiinflamatorias como esfingo y glicerofosfolípidos, y cardiolipina.