Efectos de la acidosis y la alcalosis sobre el intercambiador Cl-/HCO3- en células de túbulo colector renal.

RIVAROLA VALERIA; FORD PAULA; CHARA OSVALDO; PARISI MARIO; CAPURRO CLAUDIA

Mar del Plata, Argentina

Congreso; Congreso Conjunto de Sociedades Biomédicas; 2004

SAB - SAIC - SAN - SAF - SAI - SAFE -

Efectos de la acidosis y la alcalosis sobre el intercambiador Cl-/HCO3- en células de túbulo colector renal. Valeria Rivarola, Paula Ford, Osvaldo Chara, Mario Parisi y Claudia Capurro             Los túbulos colectores del riñón de mamífero juegan un papel central en el mantenimiento del equilibrio ácido-base. Por ende, allí, la homeostasis del pH intracelular (pHi) es crítica. Uno de los transportadores especializados en la regulación de este equilibrio es el intercambiador Cl-/HCO3- (AE). Si bien se ha reportado como afectan los desbalances ácido-base la expresión de la isoforma AE1, poco se sabe acerca de la regulación de las otras isoformas descriptas para el transportador (AE2-4). El objetivo de este trabajo fue caracterizar, en la línea celular RCCD1 (modelo de túbulo colector), que isoformas del intercambiador Cl-/HCO3- se expresan y la influencia de los desbalances ácido-base en la regulación de las mismas. El pHi se estudió, utilizando el fluorósforo BCECF por espectrofluorometría. Las células no mostraron capacidad de regular su pHi tras 1 hora de incubación en medios ácidos o alcalino (control 7,51±0,04, ácido 7,17±0,05, alcalino 7,71±0,04; p<0,001 n=15 en ambos casos). Por el contrario, al extender el período de incubación a 48 horas los pHi no fueron significativamente distintos del control. Se evaluó la velocidad de transporte de las AEs utilizando un protocolo de remoción de Cl-. La actividad de los transportadores en ambas situaciones de acidosis (1 y 48 hs) no resultó significativamente distinta del control. Por otra parte, en alcalosis la actividad resultó significativamente aumentada (p<0.02 n=15 a 1 hs; p<0,05 n=18 a 48 hs). Además, la velocidad de transporte  de las AEs fue dependiente del pH extracelular. Los estudios de Western Blot mostraron la expresión de las isoformas AE2 y AE4. Al analizar la regulación de la expresión se pudo comprobar que AE2, pero no AE4, aumentaba su expresión solo tras 48 hs de alcalosis (p< 0.05). Podemos concluir que las células RCCD1 son capaces de regular su pHi tras una alcalosis crónica debido a una regulación de la expresión de la isoforma AE2.