Doxorrubicina modifica la metilación del gen CDKN2B y la expresión de la proteína P15 en células de cáncer de mama

GÓMEZ LC; SOTTILE, ML; NADIN SB; VARGAS ROIG LM

Mar del Plata

Congreso; LX Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC); 2015

SAIC

Introducción: El cáncer de mama es una enfermedad de elevada incidencia en nuestro país. Para decidir el mejor tratamiento, actualmente se consideran factores pronósticos histológicos y proteómicos. Sin embargo, en múltiples ocasiones la terapia resulta inadecuada (por exceso o defecto), por lo que sigue siendo necesario identificar nuevos factores que permitan optimizar el diagnóstico de la enfermedad precisando su agresividad biológica y de esa manera determinar el pronóstico de la enfermedad y el tratamiento adecuado. También es importante buscar marcadores moleculares que permitan predecir la sensibilidad o resistencia a las drogas que se van a administrar para poder personalizar el tratamiento, siendo doxorrubicina una de las drogas de primera línea utilizadas. La metilación aberrante de Genes Supresores tumorales (GSTs) se relaciona con la progresión tumoral y además con la resistencia a drogas antineoplásicas. Basados en estos antecedentes, se plantearon como objetivos: a-Evaluar si la Doxorrubicina modifica la metilación de GSTs en células tumorales mamarias MCF-7 y MDA-MB231. b-Determinar si doxorrubicina modifica la expresión de dichas proteínas. Metodología: Se utilizó líneas celulares de cáncer de mama MCF-7 y MDA-MB231. Se realizó MS-MLPA y Western Blot. Resultados: Se determinó el perfil de metilación de 40 GSTs en la líneas celulares de mama MCF-7 y MDA-MB-231. Posteriormente se incubó a cada línea celular por 24 horas con una dosis de doxorrubicina determinada por ensayo clonogénico (MCF-7 IC50=24,312nM, MDA-MB 231 IC50=22,23nM). Luego de tratamiento las células fueron recolectadas y se determinó nuevamente el perfil de metilación en ambas líneas. En la línea celular MDA-MB-231 no se observó modificaciones del perfil luego del tratamiento. Sin embargo, cuando analizamos el perfil de metilación de la línea celular MCF-7 posterior al tratamiento con doxorrubicina, observamos que gen CDKN2B que se encontraba moderadamente metilado (0.51) se desmetiló completamente. Posteriormente comprobamos que la expresión de la proteína que codifica este gen denominada p15 aumenta luego del tratamiento con doxorrubicina. Conclusión: La administración de doxorrubicina en células MCF7 disminuye la metilación del gen CDKN2B y esto se ve reflejado en un aumento en la expresión de la proteína p15.