Rol de la fosforilación de Fosfolamban en la recuperación mecánica durante la acidosis

FERRERO P, SAID M, VALVERDE C, MUNDIÑA-WEILENMANN C, VITTONE L, MATTIAZZI A

La Plata

Congreso; XI Jornadas de Jóvenes Investigadores de AUGM.; 2003

AUGM -Agrupación Universidades Grupo Montevideo - Relaciones Institucionales UNLP

Salud I UNLP I Pag 447 Título: ROL DE LA FOSFORILACION DE THR17 DE FOSFOLAMBAN EN LA RECUPERACION MECANICA DURANTE LA ACIDOSIS Autores: FERRERO P, SAID M, VALVERDE C, MUNDIÑA-WEILENMANN C, VITTONE L, MATTIAZZI A. Institución: Centro de Investigaciones Cardiovasculares. Facultad de Ciencias Médicas. UNLP Dirección electrónica de contacto: ferrerop@hotmail.com Resumen: El retículo sarcoplasmático (RS) juega un rol importante en la regulación de la contractilidad y relajación miocárdicas. La fosfolamban (PLB), una proteína presente en la membrana del RS, inhibe a la bomba que retoma calcio (Ca+2) citosólico (SERCA2a) y en consecuencia la captura de este ion. La fosforilación de PLB en el residuo Ser16 por una quinasa dependiente de AMPc (PKA) y en el residuo Thr17 por una quinasa dependiente de Ca2+ y calmodulina (CaMKII), revierte esta inhibición, produciendo una aceleración de la relajación y un aumento del contenido de Ca2+ en el RS. Cuando el corazón es sometido a un período de acidosis, se produce una disminución de la contractilidad y un efecto antirrelajante, seguidos de una recuperación mecánica que ocurre a pesar de la persistencia de la acidosis. Estudios previos sugieren que el RS y PLB pueden participar en esta recuperación mecánica (Pérez y col, Expt Cardiol 1995; De Santiago y col, Biophys J 2003). Sin embargo, no se conoce todavía qué participació podría tener la fosforilación de los sitios de PLB en este fenómeno. El objetivo de este trabajo fue estudiar la fosforilación de Ser16 y Thr17 de PLB y su posible relación con la recuperación mecánica en acidosis. Para ello se indujo hipercapnia (aumento de la presión de CO2 en el medio de perfusión) en corazones perfundidos de rata, tipo Langendorff. Luego se aislaron vesículas de RS y la fosforilación de PLB se detectó mediante el uso de anticuerpos específicos para la detección de Ser16 y Thr17 fosforilados, en un análisis de Western Blot. Luego del efecto inicial depresor de la hipercapnia sobre la contractilidad (caída de la máxima velocidad de desarrollo de presión (+dP/dt) a 19.9 ± 2.1% respecto del valor control, n=11) y la relajación (aumento de la constante de tiempo de la caída de la presión desarrollada (t) en 22.0 ± 2.6 mseg, n=11) ocurrió una rápida recuperación de ambos parámetros dentro de los tres primeros minutos (+dP/dt: 36.4 ± 2%; t: 8.4 ± 0.7 mseg, n=11) y luego una lenta recuperación hacia los valores controles. La recuperación rápida de los parámetros mecánicos se asoció con un incremento significativo de la fosforilación de Thr17 (33.3 ± 7.6 % control, a 76.9 ± 7.4% acidosis 3 min) sin cambios en la fosforilación de Ser16. Sugerimos que la fosforilación de Thr17 podría estar asociada a la fase rápida de la recuperación mecánica durante la acidosis.