Variabilidad genética en ADN mitocondrial de Calomys musculinus (Rodentia, Muridae): heteroplasmía y posibles pseudogenes.

GONZALEZ ITTIG RE & GARDENAL CN

La Rioja, Argentina.

Jornada; XVIII Jornadas Argentinas de Mastozoología.; 2003

Sociedad Argentina para el Estudio de los Mamíferos

En estudios previos realizados en nuestro laboratorio sobre los patrones de dispersión y colonización de Calomys musculinus, se analizaron 16 poblaciones del centro de Argentina utilizando RFLPs-PCR de la región D-loop del ADN mitocondrial como ?marcadores? moleculares. Se detectaron 34 haplotipos. En algunos de ellos, la sumatoria de los fragmentos de restricción obtenidos con diversas enzimas, era mayor que el tamaño del producto de PCR, sugiriendo la presencia de heteroplasmía o bien, de pseudogenes de origen mitocondrial que co-amplifican con los mismos ?primers?. Para estimar la filogenia de genes en estudios de filogeografía, es importante diferenciar entre estos dos fenómenos, ya que estos tipos de secuencias generalmente responden a distintas historias evolutivas. Con esta finalidad, se procedió al subclonado del producto de PCR en el vector p-Gem Teasy y a la posterior transformación de bacterias Escherichia coli. A partir del ADN de un mismo individuo, se aislaron diferentes clones mitocondriales que presentaron diferentes patrones de restricción. Se secuenciaron 9 de los fragmentos clonados, correspondientes a 5 individuos. La distancia genética entre 7 secuencias de 1300 pares de bases del D-loop varió entre el 2 y el 3%. Se detectaron 2 secuencias de la región D-loop, una en un individuo de Uranga (pcia. de Santa Fe) y otra en uno de Laguna Larga (pcia. de Córdoba), que variaron entre sí en un 2%, pero difirieron de las otras secuencias entre el 32 y el 35%. Estas secuencias altamente divergentes, corresponderían a pseudogenes. Nuestros resultados sugieren que, en C. musculinus, coexisten la heteroplasmía y la presencia de pseudogenes de origen mitocondrial, fenómenos que pueden distinguirse por su grado de divergencia con respecto a los haplotipos más frecuentes.