Interferon-alfa-2b induce apoptosis via TGF-B1alterando la homeostasis redox de hepatocitos aislados de higados preneoplasicos de ratas.

QUIROGA A; ALVAREZ M; RONCO T; PARODY J; FRANCÉS D; MONTI J; CARNOVALE C; CARRILLO M

Buenos Aires

Jornada; XXII Jornadas de Oncologia "Angel H. Roffo"; 2006

Instituto de Oncología "Ángel H. Roffo"

Previamente demostramos que en hepatocitos aislados de hígados preneoplásicos cultivados con IFNa, se produce apoptosis por un mecanismo mediado por TGFB1 y la misma va acompañada por una disminución de las defensas antioxidantes. Otros autores demostraron que el TGFB1 disminuye los niveles de glutation (GSH) por oxidación y por alteración de la enzima limitante de su síntesis, γ-glutamilcistein ligasa (GCL). Nuestro objetivo fue evaluar si el IFNa modifica el metabolismo del GSH durante la ejecución de la apoptosis vía TGFB1 en hepatocitos de hígados preneoplásicos. Las ratas fueron sometidas a un modelo de preneoplasia experimental y los hepatocitos se cultivaron a distintos tiempos (1-24 h): A) sin IFNa, B) con IFNa, C) con IFNa + anti-TGFB1, D) con IFNa + acido ascórbico. Los niveles de ROS aumentaron significativamente (p< 0,05) a 1 h de cultivo en el grupo B (+41%). En B los niveles de GSH disminuyeron significativamente a las 7 h de cultivo (-41.89%), y en C y D GSH no varió. GSH total en el medio de cultivo aumentó, haciéndose significativo a las 7 h, con prevalencia de la especie oxidada. A las 24 h se observó el clivaje de la subunidad catalítica de GCL (GCLC) en B (western blot). C y D no variaron. El análisis de mRNA de GCL (RT-PCR) mostró una disminución significativa de los niveles del mensajero de GCLC a partir de las 3 h (-35%). Los niveles del mensajero de la subunidad moduladora (GCLM) no se alteraron en B. En A, C y D no se observaron alteraciones significativas. El TGF-β1 inducido por INFα produciría un aumento de ROS y este aumento sería responsable de los efectos observados en el metabolismo del GSH, el que actuaría como scavenger de los ROS producidos tempranamente. La rápida eliminación de GSH de los hepatocitos hacia el medio se produciría para mantener el equilibrio redox, suceso que no resulta suficiente para evitar la muerte celular por apoptosis.