Factor de necrosis tumoral alfa y óxido nítrico aumentados en hígado de ratas diabéticas inducidas por estreptozotocina. Efecto de la insulina.

INGARAMO P,; RONCO M,; FRANCÉS D,; GALLEANO M,; MONTI J,; PARODY J,; CARRILLO M,; CARNOVALE C.

Buenos Aires

Congreso; XVI Congreso Argentino de Diabetes. 10 – 12 octubre, Buenos Aires; 2008

Sociedad Argentina de Diabetes

Introducción: En diabetes mellitus se ha observado un aumento plasmático de citoquinas pro-inflamatorias, como el factor de necrosis tumoral alfa (TNFα), el cual se une al receptor de membrana celular TNF-R1 pudiendo inducir al factor de transcripción NFκB capaz de activar genes pro-inflamatorios como el de la enzima óxido nítrico sintasa inducible (NOS2). No existen estudios sobre la producción y efectos hepáticos de la citoquina en el estado diabético. Objetivo: Determinar en el hígado de ratas diabéticas el nivel de TNFα, la expresión de NOS2 y la consecuente producción de óxido nítrico (NO). Evaluar el efecto del tratamiento con insulina sobre dichas variables. Métodos: En el presente trabajo se utilizaron ratas Wistar macho de 90 días. Se dividieron en 3 grupos: control (C), diabético (D) y diabético tratado con insulina (D+I). La diabetes se indujo por una única inyección intraperitoneal (ip) de la droga diabetogénica estreptozotocina (SZ) en una dosis de 60 mg / kg de peso corporal (pc) disuelta en buffer citrato pH= 4,5. Al grupo C se le inyectó el buffer. A los 15 días post-SZ, el grupo D+I fue inyectado vía subcutánea con Insulina (30 UI/kg pc por día durante 15 días).30 días post inyección de la SZ, se anestesiaron con pentobarbital sódico (50 mg / kg pc) por vía ip, se les extrajo sangre por punción cardíaca y el hígado fue extraído y procesados para las determinaciones de NO, NOS2, TNFα y TNF-R1. Resultados: Se expresan como media ± error estándar. Glucemia (método enzimático-colorimétrico GOD-POD, g/l): C: 1,17 ± 0,01; D: 4,67 ± 0,42 *; D+I: 0,85 ± 0,01 †. Peso corporal (g): C: 439,2 ± 8,5; D: 297,2 ± 9,5 *; D+I: 421,4 ± 13,3 †. NO en sangre (Resonancia paramagnética electrónica EPR, unidades arbitrarias U.A) C: no detectable ; D: 22026 ± 2571 *; D+I: no detectable  †. Contenido de NO en homogenado total de hígado (EPR, UA). C: 49305 ± 21384; D: 199877 ± 67838 *; D+I: 37238 ± 6460 †. Por western blott, expresado como porcentaje del control (C 100%): Expresión de NOS2 en citosol hepático: D: 534,9± 257,4 *; D+I: 166,39± 55,6 †. Expresión de TNFα en lisado hepático: D: 249,9± 112,3 *; D+I: 94,09 ± 34,58†. Expresión de TNF-R1 en membrana plasmática hepática: D: 203,2± 11,9 *; D+I: 47,8 ± 10,9 *†. *p