Capacidad de formación de biofilm en Staphylococcus coagulasa-negativos aislados de animales con mastitis bovina

FELIPE, VERÓNICA; VARRONI FLORENCIA; SOMALE, PAOLA; MORGANTE CAROLINA; PORPORATTO CARINA

Córdoba

Jornada; Jornadas Argentinas de Microbiología; 2014

AAM

La mastitis bovina (MB) es una enfermedad en la ubre que causa grandes pérdidas económicas para la industria láctea. Si bien es causada por numerosos agentes etiológicos, en los últimos años la prevalencia de los Staphylococcus coagulasa-negativos (SCN) se ha incrementado a nivel mundial, considerándose un patógeno emergente. La patogenicidad de microorganismos del género Staphylococcus se atribuye a factores de superficie celular y factores de secreción que promueven mecanismos como la adhesión y en algunas cepas, la formación de biofilm. En etapas iniciales participan proteínas de adhesión tales como proteínas de unión a fibronectina (fnbp) y de aglutinación (clfA y clfB), entre otras. Por otra parte, la formación del biofilm es un proceso complejo y depende, principalmente, del polisacárido de adherencia intercelular (PIA) cuya síntesis se encuentra codificada por el operón icaADBC y regulada por genes como sigB, entre otros. Se demostró un mecanismo independiente mediado por la expresión de una proteína de superficie celular asociada a la formación de biofilm (Bap). El objetivo de este trabajo fue evaluar la capacidad fenotípica de formación de biofilm y la distribución de los genes asociados en aislamientos SCN de animales con MB. Se aislaron e identificaron (tinción de Gram y pruebas de Catalasa y Coagulasa con plasma de conejo) 82 aislamientos SCN de animales con MB de 15 tambos de Córdoba. La capacidad de formación de biofilm in vitro se determinó mediante el método de adherencia al plástico y tinción con cristal violeta (CV). A partir del valor de DO570nm obtenida, los SCN se clasificaron en Fuerte (F), Intermedio (I), Débil (D) y No Formador (NF) de biofilm. Todos los aislamientos SCN demostraron habilidad para formar de biofilm, siendo 50/82 F, 24/82 I y 8/82 D. Conjuntamente, se evaluó la presencia de los genes icaAD, bap, fnbpA, sigB y clfAB mediante PCR. Se observó señal de amplificación de icaAD en 60/82 aislamientos (35/60 F, 18/60 I y 7/60 D) y del gen bap en 11/82 aislamientos (7/11 F, 3/11 I y 1/11 D). Por otra parte, la presencia del gen regulador sigB se observó en 7/82 (4/7 F y 3/7 I) y los genes fnbpA en 13/82 aislamientos (8/13 F, 4/13 I y 1/13 D), clfA en 10/82 (6/10 F, 3/10 I y 1/10 D) y clfB en 38/82 (23/38 F, 12/38 I y 3/38D). Este estudio demuestra la alta prevalencia de SCN formadores de biofilm en bovinos lecheros de la región. Además, los genes evaluados jugarían un rol importante en dicho proceso dado que su prevalencia es mayor en aislamientos F formadores de biofilm. Nuestros resultados aportan conocimientos sobre el rol de la formación de biofilm como mecanismo de patogenicidad utilizados por SCN en MB y que sientan bases para la implementación de nuevas estrategias de prevención y/o control de esta patología en los establecimientos lecheros.