Componentes cloroplásticos en una nueva clase de vacuolas asociadas a la senescencia en hojas de Nicotiana tabacum L.

COSTA, LORENZA; MARTÍNEZ, DANA; OTEGUI, MARISA; GUIAMET, JUAN JOSÉ

Chascomús

Congreso; XXVI Reunión de la Asociación Argentina de Fisiología Vegetal; 2006

SAFV, IBB-INTECH

Un síntoma característico de la senescencia foliar es la degradación de los cloroplastos, sin embargo muy poco se conoce sobre su mecanismo. A través de observaciones por microscopía confocal hemos detectado pequeñas vacuolas ácidas (acumulan rojo neutro y/o Lysotracker Red) asociadas a senescencia (VAS). En líneas de tabaco que expresan la proteína fluorescente verde dirigida al cloroplasto (CP-GFP), algunas VAS contienen señal de CP-GFP: El objetivo de este trabajo fue caracterizar la composición de las VAS a través de un análisis bioquímico para examinar la presencia de componentes cloroplásticos. Se realizó un fraccionamiento en gradiente discontinuo de sacarosa y se seleccionó la fracción con mayor concentración de rojo neutro como aquella enriquecida en VAS (F3), resultado que se confirmó por microscopía de fluorescencia. Diferencias entre el perfil de proteínas de la fracción enriquecida en cloroplastos y la fracción enriquecida en VAS (F3) demuestra que se trata de compartimientos diferentes. La caracterización realizada hasta el momento en base a inmunodetección (Western Blot), indica que en las VAS se encuentran algunas proteínas cloroplásticas, como Rubisco, mientras que otras, como D1 (una proteína tilacoidal, componente del centro de reacción del fotosistema 2), están ausentes. Por otra parte, la ausencia de g-TIP (marcador de vacuola central) confirma que las VAS son un compartimiento distinto de la vacuola central.