Estudio polifásico de Pseudomonas fluorescentes aisladas de rizósfera de Mentha piperita L.

SANTORO, M.; BOGINO P.; GIORDANO, W.; BANCHIO, E.

Buenos Aires

Congreso; XIII Congreso Argentino de Microbiología (CAM 2013) y II Congreso de Microbiología Agrícola y Ambiental; 2013

ASOCIACION ARGENTINA DE MICROBIOLOGIA

El grupo de Pseudomonas fluorescentes es conocido por su actividad promotora natural del crecimiento vegetal (PGPR). Entre ellas se pueden mencionar Pseudomonas putida y Pseudomonas fluorescens. Actualmente, no se encuentran trabajos que reporten sobre aislamientos de cepas nativas a partir de suelo rizosférico de plantas aromáticas. Se presume que la presencia de aceites esenciales en los exudados radicales podría generar un efecto tóxico en las comunidades microbianas establecidas en la rizósfera. El objetivo de este estudio fue aislar, caracterizar y determinar posibles actividades PGPR de cepas Pseudomonas fluorescentes presentes en rizósfera de Mentha piperita L. A tal fin, se obtuvo una colección de cepas fluorescentes aisladas de rizósfera de una plantación comercial de menta de la región de Villa Dolores, Córdoba; a la cual se sumaron, como cepas de referencia, P. fluorescens WCS417r y P. putida KT2440. En la caracterización fenotípica se observó que el 66% de las cepas tuvieron un comportamiento idéntico a P. putida KT2440, mientras que sólo una cepa tuvo un comportamiento idéntico a P. fluorescens WSC417r. La genotipificación de las cepas nativas se realizó a través de un análisis de restricción del gen ARNr16S (ARDRA, Amplified rDNA Restriction Analysis) y amplificación de secuencias repetitivas a lo largo del genoma, como ERIC-fingerprinting (Enterobacterial Repetitive Intergenic Consensus) y BOX-fingerprinting. A través del estudio por ARDRA, se observó un alto grado de similitud entre la mayor parte de las cepas nativas y la cepa de referencia P. putida KT2440. Por otro lado, en los análisis por rep-PCR (ERIC-PCR y BOX-PCR), se generó un mayor número de marcadores moleculares con respecto a ARDRA, que nos permitieron diferenciar mejor entre las cepas nativas aisladas, profundizando así sobre la diversidad intrínseca presente en las especies analizadas. Simultáneamente, se realizó una selección de las cepas aisladas en base al estudio de actividades PGPR in vitro e in vivo, en contacto con explantos de menta. Sólo las cepas que presentaron mayor actividad fueron elegidas para determinar la posición filogenética en función del análisis de la secuencia total del gen ARNr 16S. Los resultados indicaron que 10 de las 14 cepas estudiadas mostraron identidad con el cluster de P. putida, 2 cepas manifestaron identidad con el cluster de P. fluorescens y 2 cepas con el cluster de P. corrugata. Concluimos entonces que entre el grupo de Pseudomonas fluorescentes aisladas existe una gran identidad con la especie P. putida entre las cuales se observan actividades PGPR de interés para futuras aplicaciones agronómicas.