Estabilidad poblacional de Intrones grupo II clase C-attC: S.ma.I2 y Sh.sp.I4.

CECILIA QUIROGA; GISELA PARMECIANO DI NOTO; MARÍA PAULA QUIROGA; FERNANDO ALONSO; DANIELA CENTRÓN

Mar del Plata

Jornada; I Jornada de Microbiología General; 2018

Los intrones del Grupo II (GII) son elementos móviles con actividad ribozímica. Dentro de este grupo se encuentran los intrones de clase C-attC, los cuales comparten el sitio blanco que las integrasas de integrón que son los sitios de recombinación de los genes cassettes (attC). Estos intrones en particular, invaden los sitios attCs insertándose en el inverse core site (ICS) de los mismos, reconociéndolos por su secuencia a nivel ADN así como también por su estructura secundaria. El objetivo de este trabajo fue caracterizar la permanencia de los intrones del GII de clase C-attC en los genomas bacterianos. Para ello, se estudio el mantenimiento de 2 intrones de clase C-attC: S.ma.I2 y Sh.sp.I4, localizados en los genomas de los aislamientos clínicos de Serratia marcesens SCH909 y Shewanella sp. Sh95 respectivamente. Se partió de colonias individuales de cada aislamiento portador de un intrón y se realizaron subcultivos sucesivos diarios durante 30 días en medio líquido Luria Bertani (LB) a 37ºC con agitación. A los días 7, 20 y 30 se sembraron placas de LB agar a partir de los subcultivos y se realizó una PCR a partir de 30 colonias mediante la técnica de hervido. Luego se realizaron reacciones de PCR con primers específicos para detectar la presencia de ambos intrones. Tanto el intrón S.ma.I2 como Sh.sp.I4 se mantuvieron en el 100% de las colonias analizadas hasta los 30 días de subcultivo. En función de estos resultados, se continuó el ensayo con el intrón S.ma.I2 durante seis meses, al cabo de los cuales se evidenció nuevamente su mantenimiento en el 100% de las colonias analizadas. Los resultados obtenidos indicarían que estos intrones se mantienen de forma estable en el genoma bacteriano una vez adquiridos. A partir de este sitio de invasión, estos intrones son susceptibles de seguir diseminándose activamente mediante eventos de transferencia horizontal genética gracias a su capacidad de movilización, pero principalmente por la acción de las integrasas de los integrones que contienen a los genes cassettes invadidos por intrones y por los rangos de huésped de los plásmidos en los que suelen localizarse.