Análisis de la Secreción de Vesículas Extracelulares en Mesocestoides corti

ANCAROLA E; MARCILLA A; PONCINI C; ROSENZVIT M C; CUCHER M

Otro; XXVII Reunión Anual Sociedad Argentina de Protozoología; 2015

ANÁLISIS DE LA SECRECIÓN DE VESÍCULAS EXTRACELULARES EN Mesocestoides cortiMaría E Ancarola1, Antonio Marcilla2, Carolina V Poncini1, Mara C Rosenzvit1, Marcela A Cucher1.1Instituto de Investigaciones en Microbiología y Parasitología Médica, Facultad de Medicina, Universidad de Buenos Aires, Argentina. 2Departamento de Biología Celular y Parasitología, Universidad de Valencia, España.E-mail: marcecucher@gmail.comIntroducción: Los parásitos cestodes son platelmintos que infectan casi todas las especies de vertebrados. Entre las enfermedades que producen se encuentran la hidatidosis y la cisticercosis consideradas enfermedades desatendidas prioritarias según la OMS. Recientemente se ha demostrado que los nematodes y trematodes parásitos secretan vesículas extracelulares (VEs) las cuales pueden ser internalizadas por células del hospedero. En la actualidad las VEs son consideradas vehículos importantes en la comunicación intercelular ya que transportan distintos tipos de componentes, entre ellos ácidos nucleicos como microRNAs (miRNAs) que pueden alterar el perfil transcripcional y el fenotipo de la célula receptora.Objetivo: Determinar si el cestode Mesocestoides corti secreta VEs y de ser así, analizar si las mismas contienen ARN incluyendo miRNAs.Resultados: Se cultivaron tetratiridios de M. corti. Luego de procesar los medios de cultivo mediante centrifugación diferencial se determinó la presencia de VEs por microscopía electrónica. Se observó que M. corti secreta VEs de 40-300 nm de diámetro y que las mismas co-sedimentan con ARN, el cual presenta un perfil de tamaños compatible con ARNs pequeños (20-200 nt). La detección de ARN no se vió afectada al incubar las VEs con proteinasa y ARNasa previo a la extracción, en cambio no se detectó ARN en las muestras de VEs tratadas con SDS, proteinasa y ARNasa lo que indica su localización intravesicular. Se corroboró la presencia de miRNAs intravesiculares mediante RT-PCR.Conclusiones: los tetratiridios de M. corti secretan VEs de diversos tamaños, las cuales poseen ARNs pequeños, en particular miRNAs. La secreción de VEs en cestodes puede constituir una nueva vía de comunicación intercelular, tanto entre individuos de la misma especie como entre parásitos y hospedero. Profundizar en el estudio de la biología celular de las infecciones parasitarias permitirá mejorar las estrategias de tratamiento y/o control de la transmisión.