Evaluación de la espectrometría de masa aplicada -MALDI-TOF- en la identificación de bacilos Gram-negativos no fermentadores.

ALMUZARA M.N.; BARBERIS C.; RODRIGUEZ, C.; REGALI N.; TRAGLIA G.; RAMIREZ M.S.; FAMIGLIETTI A.; VAY C.A.

Buenos Aires

Congreso; Congreso Argentino de Microbiología 2013; 2013

Asociación Argentina de Microbiologia

En la práctica diaria la identificación de los bacilos Gram negativos no fermentadores de glucosa (BNF) por pruebas bioquímicas convencionales suele ser dificultosa.
Con el fin de evaluar la capacidad de la espectrometría de masa (MALDI-TOF) para la identificación de estos microorganismos se realizó un estudio preliminar con 260 aislados de bacilos Gram negativos no fermentadores provenientes de especímenes clínicos correspondientes al periodo 2009-2012.
Todas las cepas fueron identificadas mediante técnicas moleculares (secuenciación del ARNr 16S, gyrB, y/o RPO) y métodos fenotípicos convencionales.
Dado que la secuenciación del ARNr 16S no puede discriminar con alta eficiencia las especies del complejo Pseudomonas putida/Pseudomonas fluorescens y las especies del género Achromobacter, y abordar a nivel de especie en este grupo requiere la secuenciación de varios genes, se consideró correcta cuando el microorganismo fue identificado por MALDI-TOF como una especie del complejo P.putida/P. fluorescens o cualesquiera de las especies del género Achromobacter respectivamente.
La espectrometría de masa fue realizada con un equipo MALDI-TOF, Bruker, Daltonics. Los resultados fueron analizados utilizando la base de datos de Biotyper (versión 3.1, BD, Bruker Daltonik GmbH, Bremen, Alemania).
Se ensayaron 260 BNF: Pseudomonas del grupo fluorescente: (Pseudomonas grupo putida; P. grupo fluorescens; P. aeruginosa) (30); Pseudomonas spp.: (P. fulva; P. oryzihabitans; P. stutzeri): (13); complejo Burkholderia cepacia (9); Burkholderia gladioli (1); Pandoraea sputorum (2); Cupriavidus pauculus (1); Stenotrophomonas maltophilia (17); Acinetobacter spp. (34); Achromobacter spp. (43) y géneros relacionados: Alcaligenes faecalis (3); Bordetella spp. (9); Kerstersia gyorium (2); Oligella urethralis (3); Familia Flavobacteriaceae: Elizabethkingia meningoseptica:(12); Chryseobacterium spp. (6), Myroides spp. (4); Shingobacterium multivorum (4); Wautersiella falsenii (2), Weeksella virosa (1), Familia Comamonadaceae: Comamonas testosteroni (1); Comamonas kerstersii (10); Delftia acidovorans (4); otros BNF: Sphingomonas paucimobilis (1); Brevundimonas diminuta (7), Brevundimonas vesicularis (1), Ochrobactrum spp. (9), Pannonibacter phragmitetus (14); Rhizobium radiobacter (5); Shewanella spp. (11), Wohlfahrtiimonas chitiniclastica (1).
Sobre un total de 260 aislados de BNF, MALDI-TOF identificó correctamente a nivel de género 258 (99 %) y a nivel de especie 248 (95 %).
MALDI-TOF pudo identificar más del 95 % de los BNF tanto a nivel de género como de especie, entre los 26 géneros diferentes ensayados, superando por la exactitud y rapidez a la identificación fenotípica y molecular hasta ahora conocida.