La proteína de expresión específica tumoral MageB2 contrarresta la respuesta a estrés nucleolar mediada por proteínas ribosomales

LADELFA MF; PECHE, LY; TOLEDO, MF; LAISECA, JE; SCHENIDER, C; MONTE, M

Mar del Plata

Congreso; Congreso Sociedad Argentina de Investigaciones Clínicas; 2014

MageB2 es una proteína de expresión específica tumoral perteneciente a la familia MAGE. Anteriormente evidenciamos in vitro e in vivo que su expresión está directamente asociada a la proliferación celular. Además, por RT-qPCR observamos que el silenciamiento génico de MageB2 disminuye al 50% la actividad de E2F1, implicado en la transcripción de genes involucrados en el pasaje de la fase G1 a S del ciclo celular. En este trabajo observamos por ensayos de co-inmunoprecipitación que MageB2 se une a HDAC1, regulador negativo de E2F1, resultando ésta unión en un aumento de la fracción libre y activa de E2F1. A diferencia de lo observado con otras proteínas MAGE, MageB2 presenta localización nucleolar. El nucléolo es el lugar de biogénesis de ribosomas, encargados de sintetizar las proteínas que permiten el crecimiento y la proliferación celular. Perturbaciones de este proceso contribuyen al estrés nucleolar y desencadenan una respuesta mediada por las proteínas ribosomales L11 y L23, las cuales relocalizan al núcleo, se unen a Mdm2 e inhiben el efecto estabilizante que ésta causa sobre E2F1. Nosotros observamos que bajo condiciones de estrés nucleolar (tratamiento con ActD), MageB2 también relocaliza al núcleo. Sin embargo, esto no afecta su capacidad de unirse a HDAC1 ni de inducir a E2F1, (evidenciado por RT-qPCR y genes reporteros). Más aún, bajo éstas condiciones, MageB2 contrarresta el efecto  negativo que L11 y L23 ejercen sobre E2F1. Sin embargo, este efecto es independiente de Mdm2, ya que también se evidencia en células MEF mdm2-/-. Por último, medimos incorporación de BrdU en presencia y ausencia de ActD en células U2Os silenciadas para la expresión de MageB2. Observamos que el silenciamiento génico de MageB2 incrementa al doble (p<0,05) el arresto celular inducido por ActD, indicando que la expresión endógena de MageB2 colabora con la progresión del ciclo celular bajo condiciones de estrés nucleolar, lo cual contribuye a su potencial oncogénico.