Implicancias biológicas de la interacción entre HO-1 y el co-activador del receptor de andrógenos RANBPM, en líneas celulares de PCa

PAEZ, ALEJANDRA; SCHUSTER, FEDERICO; GIUDICE, JIMENA; COTIGNOLA, JAVIER; VAZQUEZ, ELBA; GUERON, GERALDINE

Mar del Plata

Congreso; LIX Reunion Anual de la Sociedad Argentina de Investigacion Clinica; 2014

Sociedad Argentina de Investigación Clínica

Hemo-oxigenasa 1 (HO-1), la enzima limitante en la degradación del hemo, cumple una función más allá de su actividad enzimática. Si bien HO-1 se transloca al núcleo en células de cáncer de próstata (Pca), carece de dominios de unión al DNA. Considerando su asociación a genes relevantes en PCa, proponemos que HO-1 es un co-regulador transcripcional que favorece un fenotipo menos agresivo. Mediante un abordaje proteómico, demostramos por primera vez la interacción de HO-1 y Muskelina, una proteína involucrada en la regulación de la morfología y adhesión celular, que además se asocia a RANBPM, un co-activador del receptor de andrógenos (AR). Dado que la inducción de HO-1 en células de PCa no altera los niveles proteicos del AR pero modula la expresión de sus genes blanco, estudiamos la relación entre los niveles de RANBPM y HO-1. Se obtuvieron extractos proteicos de células PC3 tratadas o no con hemina (80µM, 24 hs), el inductor farmacológico de HO-1. Mediante Western Blot utilizando un anticuerpo específico, comprobamos que la inducción de HO-1 disminuye los niveles de RANBPM. Además células PC3 tratadas o no con hemina, se fijaron con MEOH 100% y se incubaron con el anticuerpo primario anti-RANBPM y el secundario Alexa Flúor 488 y por microscopía confocal se determinó la fluorescencia total y el porcentaje de células con localización de RANBPM citoplasmática o nuclear. Si bien los resultados avalan la disminución de RANBPM total, es interesante notar que sus niveles nucleares aumentan con hemina. Estos resultados fueron confirmados por inmunoprecipitación con extractos proteicos producto del fraccionamiento núcleo-citoplasma. Concluimos que HO-1 podría formar un complejo con RANBPM impidiendo su unión al AR y disminuyendo así la expresión de genes río abajo del receptor.