IQUIBICEN   23947
INSTITUTO DE QUIMICA BIOLOGICA DE LA FACULTAD DE CIENCIAS EXACTAS Y NATURALES
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
ROL DE LA METILTRANSFERASA PRMT8 EN CÉLULAS MADRE PLURIPOTENTES
Autor/es:
LUZZANI C; SOLARI C; WAISMAN A; LOSINO N; SEVLEVER G; BARAÑAO L; MIRIUKA S; GUBERMAN A
Lugar:
Mar del Plata
Reunión:
Congreso; SAIC 2013; 2013
Institución organizadora:
SAIC
Resumen:
Las células madre embrionarias (ESCs) son célulasderivadas del macizo celular interno (ICM) del blastocisto.Poseen la capacidad de auto-renovarse indefinidamenteen cultivo y de dar origen a células de las trescapas germinales, propiedad conocida como pluripotencia.En un trabajo anterior buscamos enzimas remodeladorasde la cromatina que fueran moduladas durante elproceso de diferenciación de ESC. Esta búsqueda arrojóuna serie de genes candidato que podrían tener un rolen el mantenimiento de las propiedades básicas de lasESCs. En este trabajo estudiamos la relevancia de unode estos genes, la metiltransferasa Prmt8. Utilizandoun protocolo de diferenciación in vitro, comprobamosque Prmt8 se regula negativamente durante el procesode diferenciación. Por otra parte, construimos una líneaestable de mESCs que contiene en su genoma unshRNA inducible contra Prmt8. Probamos que al inducireste shRNA los niveles de mensajero de esta enzimadisminuyen, y que esta disminución, en un principio, noafecta la capacidad de auto-renovación de las células.Mediante análisis de inmunofluorescencia estudiamosla presencia y localización de marcadores del estadoindiferenciado. No encontramos diferencias sustancialesen los marcadores analizados al comparar lascélulas cultivadas en presencia del inductor del shRNAcon las células control. Por otro lado, diferenciamos lalínea que sub-expresa Prmt8 y encontramos que loscuerpos embrioides evolucionan de manera diferenteal control. Además, la pérdida de Prmt8 parece afectarel ciclo celular de ESCs, disminuyendo el número decélulas en fase S. Por último, utilizando un sistemaheterólogo, analizamos si la expresión exógena de losfactores de transcripción de pluripotencia modula laexpresión de Prmt8. En conjunto los datos sugieren quePrmt8 es regulado positivamente por los estos factoresde transcripción y modulado durante la diferenciación,hecho que podría ser clave en la determinación del tipocelular de destino