CONICET | Buscador de Institutos y Recursos Humanos

El Manganismo es un desorden neurológico originado por exposición crónica al manganeso (Mn) que presenta características clínicas y vías de señales similares a las del Parkinson Idiopático. El Mn se acumula preferentemente en los ganglios basales y en particular, en las mitocondrias de los astrocitos. Estas organelas son dinámicas y de morfología variable como resultado del equilibrio entre eventos de fusión y fisión. Dicho balance es esencial para las funciones mitocondriales y está regulado por un grupo de GTPasas, entre las cuales, las más estudiadas son Opa-1 y Drp-1. El objetivo de este trabajo consistió en estudiar el rol de estas proteínas en la apoptosis inducida por MnCl2 750µM en células de astroglia de rata. Empleando Mitotracker Red y microscopía de fluorescencia se determinó que el Mn indujo fragmentación de las redes mitocondriales (p<0,001) y disipación del ∆φm (p<0,001). Mediante WB e inmunocitoquímica, se demostró que el Mn indujo clivaje y/o disminución de la expresión de la proteína de fusión Opa-1 (p<0,05) además de su liberación al citosol y un incremento de la expresión de la proteína de fisión Drp-1 (p<0,001) sumado a su translocación a la mitocondria. El rol de ambas proteínas en la apoptosis se estudió empleando inhibidores de Drp-1 (CsA y Mdivi-1) y sobre-expresando los niveles de Opa-1. Los resultados indicaron que CsA, Mdivi-1, Opa-1 WT y Q297V (mutante de ganancia de función) previnieron la muerte celular inducida por Mn en un 25, 30, 20 y 25%, respectivamente (Ensayo de MTT; p<0,01). Así mismo, se cuantificó un 35, 30, 20 y 20% (p<0,001) más de células con redes mitocondriales intactas y con preservación del ∆φm (p<0,001), además de una prevención del 40, 40, 35 y 30% (p<0,001) en la aparición de núcleos apoptóticos detectados con Hoechst 33258. Los resultados demuestran que un desbalance en la dinámica mitocondrial que lleva a una fisión aumentada, contribuye a la apoptosis inducida por Mn en células astrogliales.