Efecto de Acetilcolina end¨®gena sobre la migraci¨®n de c¨¦lulas Dendr¨ªticas y monocitos hacia c¨¦lulas trofobl¨¢sticas humanas y contribuci¨®n a un ambiente tolerog¨¦nico

PAPARINI, D; GORI, S; GRASSO, E; SCORDO, W; RAMHORST, R; SALAMONE, G; P¨¦REZ LEIR¨®S, C

Mar del Plata

Congreso; LVIII Reunion Anual de SAIC; 2012

Sociedad Argentina de Investigación Clinica y Sociedad Argentina de Inmunología

  La generaci¨®n y desarrollo de la interfase materno-placentaria es un proceso din¨¢mico que involucra la acci¨®n concertada de c¨¦lulas y mediadores favoreciendo un ambiente tolerog¨¦nico. C¨¦lulas dendr¨ªticas (CD) y macr¨®fagos, son reclutados y ¡°educados¡± por c¨¦lulas trofobl¨¢sticas (Tb) para promover el crecimiento fetal. Las c¨¦lulas inmunes y la placenta presentan un sistema colin¨¦rgico no neuronal,  sin embargo, su participaci¨®n en la inducci¨®n del ambiente tolerog¨¦nico en la interfase temprana no se ha aclarado a¨²n. Nuestro objetivo fue evaluar el efecto de acetilcolina (ACh) end¨®gena en la interacci¨®n de Tb con CD y monocitos (Mo). Se purificaron Mo de sangre perif¨¦rica de mujeres voluntarias sanas en edad reproductiva por t¨¦cnicas inmunomagn¨¦ticas (pureza >95%). Para obtener CD, los Mo se diferenciaron 5 d¨ªas con IL-4/GM-CSF. Se evalu¨® la expresi¨®n de colina acetil transferasa (ChAT), acetilcolinesterasa (AChE) y receptores muscar¨ªnicos M1-M5 en la l¨ªnea celular trofobl¨¢stica Swan-71 por RT-PCR y WesternBlot. Mediante co-cultivo de c¨¦lulas inmunes con Tb, se analiz¨® la migraci¨®n de CD y Mo hacia Tb, su interacci¨®n, y el efecto de ACh end¨®gena por citometr¨ªa y detecci¨®n de MCP-1, IL-10 y TNF-¦Á por ELISA. Observamos que Tb expresa ChAT, AChE y los 5 subtipos de receptor. La neostigmina (Neo) 20 uM aument¨® la producci¨®n de IL-10 en Tb, sin variar TNF-¦Á ni MCP-1. En la interacci¨®n Tb-CD se observ¨® aumento de IL-10 y aumento de MCP-1 inducido por Neo. El medio condicionado (MC) de Tb indujo migraci¨®n de CD (X¡ÀES: 3.674¡À193 vs 413¡À104 c¨¦l/90 min; P