Búsqueda de la mejor combinación entre enzima, sustrato, tejido y posibilidad de recuperación de B-esterasas de Planorbarius corneus para ser utilizadas como biomarcadores de exposición al organofosforado metilazinfos

OTERO, S.; KRISTOFF, G

Buenos Aires

Congreso; IV Congreso SETAC Argentina; 2012

SETAC Argentina

El metilazinfos (MAZ) es un insecticida organofosforado del cual se han encontrado concentraciones ambientales entre 0,06 y 420 µg/L. Su mecanismo de acción consiste en la inhibición irreversible de las B-esterasas: colinesterasas (ChEs) y carboxilesterasas (CES). Las últimas participarían en la protección frente a la exposición a MAZ compitiendo con ChE por la unión al pesticida. En investigaciones anteriores se demostró que el MAZ es capaz de inhibir las ChEs y las CEs presentes en el homogenato del tejido blando total (T) de Planorbarius corneus. El objetivo de este trabajo consistió en poder elegir la combinación más sensible y con mayor tiempo de recuperación entre tejidos y sustratos de B-esterasas en P. corneus expuestos a MAZ para poder ser utilizadas como biomarcadores de exposición a este insecticida. Para ello se midió, para las regiones de la glándula digestiva (GD) y pulmón (P), la respuesta de dichas enzimas frente a la exposición a siete concentraciones de MAZ por 48 horas. La actividad ChE se midió utilizando acetiltiocolina como sustrato, mientras que la actividad CE se midió utilizando p-nitrofenilacetato (p-NFA), p-nitrofenilbutirato (p-NFB), 1-naftilacetato (1-NA) y 2-naftilacetato (2-NA). También se realizaron bioensayos de recuperación en los cuales transcurridas las 48 horas de exposición se transfirieron a soluciones libres del insecticida y se determinaron ChE y CES. Los resultados demostraron que las CES son más sensible al MAZ que las ChEs siendo las concentración de no efecto (NOEC) dos órdenes menores en las primeras e inhibiéndose a concentraciones ambientales. Utilizando p-NFA y p-NFB tanto en el P como en la GD las CES resultaron más sensibles que en T (NOEC 0,001 y 0,005 mg/L respectivamente). Con respecto a la recuperación de la actividad, la ChE regresó a los valores controles luego de 21 días, tanto en P como en GD. Las CES con p-NFA se recuperaron luego de los 14 días en T, P y GD, mientras que con p-NFB en T y en P se recuperaron luego de 21 días y en la GD luego de 14 días. Teniendo en cuenta la sensibilidad y el tiempo de recuperación se concluye que las CES de P de P. corneus determinadas con p-NFB resultan muy buenos biomarcadores de contaminacón acuática por OPs.