Cross-talk entre las vías de transducción de señales del receptor de progesterona (PR) y de heregulina (HRG) en células T47D.

L.LABRIOLA, M.SALATINO, C.PROIETTI, O.COSSO, A.PECCI, A.KORNBLIHTT, E.CHARREAU AND P.ELIZALDE

Instituto de Oncologia "Angel Roffo"

Jornada; Jornadas Multidisciplinarias de Oncología Hospital "Angel H. Roffo"; 2002

En este trabajo se estudió la activación del receptor de progesterona (PR) por heregulina (HRG), ligando de receptores con actividad de tirosina quinasa tipo I, en las células de carcinoma mamario humano T47D. Se investigó primero el efecto de HRG sobre los niveles proteicos de PR en células T47D. Se encontró que el tratamiento con HRG (20ng/ml), indujo  una disminución tanto en los niveles proteicos de las isoformas Ay B del PR como en la cantidad de sitios específicos de unión a progesterona y produjo un aumento en la proporción de PR con localización nuclear. Al estudiar la capacidad de HRG en la inducción del complejo entre PR y el elemento respondedor a progesterona (PRE) mediante ensayos de ¨gel shift¨, se observó que HRG indujo la formación  de dicho complejo. Con el fin de investigar si  HRG  podía inducir la transactivación del PR, células T47D fueron transfectadas en forma transiente con un vector conteniendo dos PRE río arriba del gen de la cloranfenicol acetil transferasa (CAT) y se observó que el tratamiento de las células con HRG provocó un aumento significativo en la actividad de CAT. Se investigaron luego los mecanismos moleculares involucrados en la acción de HRG. El bloqueo de la expresión de ErbB-2 inhibió la capacidad de HRG de inducir la formación del complejo PR-PRE, así como de aumentar la actividad de CAT.  Por otro lado, el pretratamiento de  las células con el inhibidor específico de MEK-1 PD98059 (10uM) inhibió también  la capacidad de HRG de transactivar al PR. Ensayos de fosforilación ¨in vitro¨ mostraron que MAPK activadas por HRG serían capaces de fosforilar al PR. Este efecto fue inhibido cuando las MAPK fueron inactivadas por  PD98059. Nuestros hallazgos demuestran que HRG activa al PR mediante un mecanismo que requeriría tanto de la presencia de ErbB-2 funcional como de la activación de las MAPK. Además, mostramos  que MAPK activadas por HRG inducirían la fosforilación ¨in vitro¨ del  PR humano.