INVESTIGADORES
SCARPECI Telma Eleonora
congresos y reuniones científicas
Título:
Expresión de diferentes isoformas de glutamina sintetasa de Lycopersicon esculentum
Autor/es:
SCARPECI, TELMA E; VALLE, ESTELA M; BOGGIO, SILVANA B
Lugar:
Mendoza, Argentina
Reunión:
Congreso; SAIB; 1999
Institución organizadora:
Sociedad Argentina de Investigaciones en Bioquímica y Biología Molecular (SAIB)
Resumen:
La biosíntesis de los aminoácidos se lleva a cabo
mediante la asimilación del amonio. La enzima glutamina sintetasa (GS) es
crucial para este proceso catalizando la formación de glutamina a partir de
glutamato, amonio y ATP. En plantas vasculares existen distintas isoformas de
GS, en el cloroplasto (GS2) y en el citosol (GS1) cuyas proporciones varían en
los distintos órganos y estadíos de la planta. Por otra parte hay evidencias
que sugieren que ambas isoformas desarrollarían diferentes funciones in vivo.
El objetivo planteado para este trabajo fue el
estudio de la distribución de las dos isoformas de GS presentes en los
distintos órganos de la planta de tomate. Para ello se realizaron geles nativos
y desnaturalizantes de poliacrilamida, los cuales fueron teñidos por Coomasie
Brillant Blue y analizados por Western-blot empleando anticuerpos obtenidos en
nuestro laboratorio a partir de GS1 recombinante. Además se determinaron en
geles nativos las actividades de GS en los distintos órganos.
Se observó actividad de GS en raíz, hoja y fruto
verde y no pudo ser detectada en fruto rojo Los análisis inmunológicos
realizados en geles nativos revelaron la existencia de varias isoformas, siendo
la de menor movilidad electroforética la forma activa de la enzima. Cuando se
realizaron geles desnaturalizantes y Western-blot se observaron dos tipos de
subunidades de GS en raíz y fruto y un solo tipo en hoja.
Estos resultados indicarían que GS1 y GS2 estarían
constituidas por subunidades de diferente peso molecular. Además la forma
activa observada de GS estaría constituida por el mayor número de subunidades
(octamérico). El diferente grado de asociación de subunidades de GS en los
distintos tejidos podría reflejar una regulación diferencial de las actividades
enzimáticas.
