“Producción de plantas transgénicas tolerantes a estrés oxidativo”

VALLE EM; SCARPECI TE; BONDINO H; TOGNETTI VB; CARRILLO N

Tucumán, Argentina

Conferencia; Sesión Biotecnología en plantas. Coloquio DAAD Biotecnología y Química; 2004

CONICET-UN

El estrés oxidativo en las plantas surge por un desbalance entre los procesos generadores de especies activas del oxígeno (EAO) y los encargados de su eliminación. Esta situación se puede generar cuando las plantas son enfrentadas a condiciones ambientales adversas, tales como alta irradiación, temperaturas extremas, radiación UV, sequía, herbicidas y/o patógenos. Se han intentado diferentes estrategias para lograr incrementar la capacidad antioxidante de las plantas, con resultados poco satisfactorios hasta el momento. En nuestro laboratorio nos hemos abocado a la obtención de plantas transgénicas capaces de tolerar múltiples situaciones de estrés ambiental. Para ello empleamos dos diseños experimentales. En un caso, se introdujo un gen particular y se estudió la capacidad de las plantas para hacer frente a múltiples situaciones de estrés generadoras de EAO y en el otro, se seleccionaron mutantes resistentes a estrés oxidativo. El gen codificante de flavodoxina (fld), una proteína de cianobacterias ausente en plantas, que participa en la generación de equivalentes de reducción en situaciones de ausencia de hierro, fue introducido en tabaco. Estas plantas resultaron ser tolerantes a condiciones severas de estrés oxidativo y en forma dependiente de los niveles acumulados de fld. Además, estas plantas generaron menores niveles de EAO, en comparación con las plantas controles. La acumulación de fld en los cloroplastos fue crucial, ya que su presencia en el citosol no fue efectiva en conferir tolerancia a ningún tipo de estrés.En el segundo caso, se ensayó la capacidad de mutantes de Arabidopsis de sobrevivir a condiciones oxidativas. Estas mutantes fueron generadas por transformación con un vector de “activación dirigida” (T-DNA) conteniendo cuatro copias de un enhancer del promotor del gen 35S del virus del mosaico del coliflor. Se aislaron 11 mutantes diferentes, las cuales fueron capaces de tolerar diferentes condiciones de estrés ambiental. El objetivo es la identificación y aislamiento del gen responsable de esta tolerancia en cada una de estas mutantes