Interacción de valsartán con Cu(II). Evaluación de su potencial antitumoral

DI VIRGILIO A.L.; ETCHEVERRY S.B.; WILLIAMS P.A.M.

Congreso; XXVIII Congreso Argentino de Química y 4to. Workshop de Química Medicinal; 2010

Introducción La hipertensión es una enfermedad actual que induce riesgos cardiovasculares severos y presenta una frecuencia de 4,5 % en la población. Por otra parte, es conocido el hecho de que los iones metálicos son esenciales para las células y varios compuestos metálicos presentan interesantes propiedades farmacológicas. En muchos casos, la combinación de fármacos con metales de transición permite el uso de menores dosis por sinergismo de las propiedades farmacológicas de los componentes. En esta comunicación se reporta la síntesis, caracterización y bioactividad en cultivos de osteoblastos de un complejo de  Cu(II) con valsartán que es un antihipertensivo del grupo de los sartanes.   Parte experimental Síntesis del complejo Cu-valsartán ([Cu(vals)(H2O)4]2.4H2O) Se disuelven 0,5 mmol de acetato de cobre(II) en 2 ml de agua y se agrega una solución etanólica de valsartán (20 ml). Se lleva a pH 7-8 con NaOH 1M. Se agita 30 min a 50 ºC hasta reducción de volumen a la mitad y se precipita con agua. Se filtra el polvo celeste y se lava repetidamente con agua. Análisis elemental: Anal. Calc. para C48H78N10O18Cu2 : %C: 47,8; % H: 6,3; %N: 11,5. Exp: %C: 47,9; % H: 6,4; %N: 11,4. Estudios en fase sólida Reflectancia difusa: 590, 680 nm (banda ancha). Análisis Termogravimétrico (TGA): atmósfera de oxígeno, velocidad de flujo de 50 ml/min). El proceso se inicia con una pérdida de peso de un 18 % a 180 ºC, correspondiente a doce moléculas de agua coincidiendo con el valor calculado. La segunda pérdida de 11 % está acompañada por una débil señal endotérmica en el DTA a 216 ºC. Se producen luego diferentes eventos con señales exotérmicas en DTA a 319 ºC (mediana) y 407 ºC (muy fuerte) hasta 800 ºC donde se forma el CuO como residuo final. El residuo se identifica por espectroscopía infrarroja (13,1 %, de acuerdo con el valor teórico). Espectros vibracionales (Infrarrojo y Raman) Los cambios más notables que se observan por complejación se deben al grupo carboxílico. El estiramiento C=O del ligando libre en 1730 cm-1 (IR, f) desaparece por complejación y se observan los estiramientos simétrico y antisimétrico del grupo carboxilato coordinado al metal (nas 1624 cm-1 (IR, mf) y 1626 cm-1 (R, m)) y (ns 1514 cm-1 (IR, d) y 1494 cm-1 (R, f)). La diferencia entre ambos estiramientos, 116 cm-1, sugiere una coordinación puente del grupo carboxilato.           Estudios en solución La disolución del complejo en etanol genera una especie estable al menos durante 90 minutos, sin variación en el espectro UV-visible (lm = 688 nm, e = 90 M-1cm-1). Para evitar procesos de precipitación, las titulaciones espectrofotométricas se realizaron en etanol, usando metóxido de sodio para llevar el pH a 7. La concentración de valsartán se fijó en 4x10-3 M y se agregaron cantidades crecientes de cobre para obtener diferentes relaciones molares ligando-metal. Se midieron los espectros UV-vis y se obtuvo una relación L/M 1/1 siguiendo la absorbancia de la banda en 688 nm, coincidente con los resultados en fase sólida. Efectos en cultivos celulares Viabilidad celular: tests de captación de rojo neutro (RN) y de MTT Los osteoblastos normales MC3T3-E1  y los tumorales UMR106 fueron cultivados en DMEM a 37 ºC en atmósfera de aire con 5% de CO2. Al alcanzar ca. 70% de confluencia fueron incubados con diferentes concentraciones de valsartán y del complejo Cu-valsartán, efectuándose los tests de captación de rojo neutro (RN) y MTT (bromuro de 3-(4,5-dimetiltiazol-2-yl)-2,5-difeniltetrazolio). El complejo Cu-valsartán resultó más citotóxico para los osteoblastos normales que para los tumorales en ambos tests de viabilidad celular. Así, los gráficos muestran una disminución en la captación de RN que indica una alteración del metabolismo lisosomal en los osteoblastos normales a partir de 50 µM. Por otro lado, la conversión de MTT a azul de formazán disminuye en forma dosis respuesta en ambas líneas osteoblásticas siendo mayor el efecto en los osteoblastos normales.  Estos resultados serán extendidos a otras líneas tumorales a fin de evaluar la potencial aplicación del complejo como compuesto antitumoral. Conclusiones Se obtuvo y caracterizó un complejo dimérico formado entre cobre(II) y valsartán a pH 7-8. En solución etanólica se forma un compuesto con la misma estequiometría (detectado por titulación espectrofotométrica). El complejo inhibió más la proliferación de las células normales en ambas determinaciones biológicas.