Inmunizacion tópica con materia blanda

CAIMI A; PARRA F; HIGA L; PEREZ AP; ROMERO EL; MORILLA MJ

Buenos Aires

Workshop; Cuarto simposio de Jovenes investigadores; 2014

Asociacion Argentina de Nanomedicina

Inmunizacion tópica con materia blanda Caimi A, Parra F, Higa L, Perez AP, Romero EL, Morilla MJ Programa de Nanomedicinas, UNQ. Introducción: los arqueosomas ultradeformables (AUD) son vesículas preparadas combinando activadores de borde, fosfatidilcolina de soja y arqueolipidos de arquebacterias Halorubrum tebenquichense. Una vez sobre la superficie de la piel, los AUD tienen la capacidad de atravesar el estrato corneo intacto y llegar a la epidermis. Cuando se incorpora un antígeno a su estructura, son capaces de generar una respuesta inmune luego de su aplicación tópica, siendo los arqueolipidos glicosilados los responsables de su actividad adyuvante. Previamente mostramos que la aplicación tópica de AUD conteniendo el antígeno modelo ovoalbúmina (OVA) sobre ratones Balb-c induce títulos OVA-específicos de IgG de 10 a 100 veces mayores que los generados por iguales dosis de vesículas sin arqueolipidos (LUD-OVA) 1. En la piel las células dendríticas dérmicas y los macrófagos son dos blancos celulares de los AUD. Postulamos que los glicolipidos terminales de los arqueolípidos interactuarían con receptores específicos presentes en las celulas presentadoras de antigenos y asi favorecerian su captura y presentacion de los antigenos incorporados en las vesiculas. Sin embargo diferentes cepas de ratones expresan diferente conjunto de ligandos superficiales, por ejemplo las células dendríticas de ratones C3H/HeN expresan el receptor de manosa en mayor proporción que las de ratones BALB-c 2. El objetivo de este trabajo fue comparar la respuesta generada en ratones C3H/HeN y BALB-c luego de la administración tópica de OVA incorporada en AUD. Metodología: se administraron de forma tópica AUD-OVA, LUD-OVA y AUD vacios combinados con OVA libre (AUD+OVA) en dosis de 80 ± 6 µg de OVA/170 ± 28 µg lípidos los días 0, 7,14 y 21 sobre ratones C3H/HeN y BALB-c. Se tomaron muestras de sangre semanalmente y se obtuvieron títulos de IgG serico a través de un ensayo de ELISA indirecta. Resultados: El tamaño medio de las formulaciones estuvo dentro del rango nanométrico mientras que el potencial zeta fue -77 mV, -24 mV y -77 mV para AUD-OVA, LUD-OVA y AUD vacios, respectivamente. Tras la administración tópica de AUD-OVA, ambas cepas de ratones generaron títulos de IgG serico que fueron similares en magnitud y alcanzaron un máximo en el dia 14. La administración de vesículas sin arqueolipidos generó una respuesta de 100 veces menor magnitud que la obtenida con AUD-OVA. Remarcablemente la aplicacion de AUD conteniendo OVA produjo títulos de IgG de igual magnitud que la aplicación de AUD mezclados físicamente con OVA. Conclusiones: Los AUD aplicados topicamente inducen la poducción de anticuerpos sericos antígeno específicos, en diferentes cepas de ratones. La respuesta es independiente de la expresión del receptor de manosa en celulas dendriticas dermicas, mas aun no es necesaria la incorporación del antigeno en las vesiculas facilitando su producción. Los AUD son una herramienta estratégica para la vacunación topica con materia blanda manteniendo la integridad del strato corneo. Referencias 1. Higa LH, Schilrreff P, Iriarte M, Perez AP, Roncaglia DI, Morilla MJ and Romero EL. ?Ultradeformable archaeosomes as new topical adjuvants Nanomedicine, Nanotechnology, Biology and Medicine, 2011. 2. Stella Eugenie Autenrieth and Ingo Birger Autenrieth. Variable antigen uptake due to different expression of the macrophage mannose receptor by dendritic cells in various inbred mouse strains. Inmunology 2008 127, 523?529