Maximizando estabilidad, actividad antioxidante y propiedades antitumorales del EGCG en nano-arqueosomas: Nano-Matcha

GONZALEZ V; MARIA J MORILLA; HIGA L; EDER L ROMERO

Cordoba

Congreso; XXI Encuentro de Superficies y Materiales Nanoestructurados; 2022

universidad Rio CUarto

Maximizando estabilidad, actividad antioxidante y propiedades antitumorales del EGCG en nano-arqueosomas: Nano-MatchaGonzález E., Victoria R. D.(1)*; Altube, María Julia(1); Morilla, María José(1); Higa, Leticia H.(1); Romero, Eder L.(1).*correo electrónico:vgonzalezepelboim@uvq.edu.ar(1)Centro de Investigación y Desarrollo en Nanomedicinas, Departamento de Ciencia y Tecnología, Universidad Nacional de Quilmes, Roque Sáenz Peña 352, Bernal Buenos Aires, Argentina.Las propiedades antioxidantes y terapéuticas de la catequina polifenólicaepigalocatequin-3-galato (EGCG) tan abundantemente reportadas in vitro, tienen un correlato muy pobre con los efectos observados tras suadministración como té verde; no solo por su escasa biodisponibilidad, sino por su gran labilidad frente a la oxidación y degradación. En este trabajo, mostramos por primera vez como su incorporación en nanomedicinas especialmente diseñadas para reducir su degradación, abre todo un nuevo portafolio de potenciales aplicaciones terapéuticas para el EGCG, incluyendo el control del microambiente tumoral. En primer lugar, se diseñaron nanoarqueosomassalvajes(nanoARCs), a partir delípidos extraídos de las arqueas halófilasHalorubrumtebequichense,principalmente ellípido polar (LP)2,3-di-O-fitanil-sn-fosfatidilglicerofosfato metil-éster (PGP-Me, un ligando del receptor scavengerclase A de macrófagos), y el carotenoide no polarBacterioruberina (BR, con extensaactividad antioxidante)y Tween80. Por otro lado, el té verde matcha (TVM) comercial, fue descafeinado y extraídas sus catequinas ricas en EGCG (37% p/p). Dicho extracto fue incorporado en nanoARCs mediante el método de hidratación de la película lipídica y posterior sonicación, resultando en nanoARCs-TVM o más brevemente, Nano-matcha. Los tamaños resultaron del orden nanométrico con un potencial Z altamente negativo.En segundo lugar, hallamos que,al cabo de 2 meses, aun almacenados a 4°C y protegidos de la luz, la capacidad antioxidante equivalente Trolox (TEAC) del TVM[medida por ABTS y DPPH] fue 8,5 veces menor que la de deNano-matcha. Asimismo, en tanto la TEAC de BR aumentó 10 veces, la TEAC de EGCG disminuyó 1,7 veces.Observamos además que, tras 2 meses, la inhibición del 50% de los radicales en función de la relación µg EGCG/µg BR aumentó. Esto indico que en Nano-matcha, la BR ejerció una fuerte protección antioxidante del EGCG. En tales condiciones de almacenamiento, los polifenoles del TVM, cuantificados por FolinCiocalteu, disminuyeron 3,5 veces en comparación con los de Nano-matcha que se mantuvieron en 660 Eq ácido gálico/g EGCGdurante el mismo periodo. Es sabido que el EGCG actúa como un inhibidor de PDL-1, molécula de punto de control inmune, que conduce al aumento de la respuesta inmune antitumoral [2].Por tal razón en tercer lugar, determinamos la citotoxicidad mediante MTT, de Nano-matchasobre células tumorales de pulmón (A549); hallamos que en tanto el extracto TVM fue inocuo, a 6,3 µg/ml LP de Nano-matcha, la viabilidad se redujo un 50% [valores comparables a los obtenidos con quimioterapéuticos convencionales]. Parte de la actividad antitumoral de Nano-matcha podría adjudicarse a su intensa actividad antioxidante, y a su actividad como agente anti-PDL-1. Evidencia adicional señala que la actividad antitumoral del EGCG se debería a la perturbación de la fluidez/orden de membrana [4]. Por este motivo revelamos mediante la sonda fluorescente Laurdanque en tanto EGCG no tuvo efecto, su concentración equivalente en Nano-matcharedujo el orden de la membrana de las A549.En cuarto lugar, empleando monocitos humanos THP-1 transformadas a macrófagos, como modelo de macrófagos de microambiente tumoral, hallamos que 3,25 µg/ml de LP de Nano-matchageneró una disminución de la expresión del ligando CD204, efecto que estaría asociado a un cambio de fenotipo M2 pro-tumoral a M1 pro-inflamatorio y con potencial actividad anti-tumoral[3].Estudios en curso empleando modelos in vitro/ vivo mas predictivos, se están conduciendo para revelar la eficacia de Nano-matcha como agente quimioterapéutico frente a patologías de interés global [1], como son ciertas formas de cáncer pulmonar.1.Thai, A. A., Solomon, B. J., Sequist, L. V., Gainor, J. F., &Heist, R. S., Lancet 398 (2021) 535-54.2.Fujiki, H., Watanabe, T., Sueoka, E., Rawangkan, A., &Suganuma, M., Molecules and cells41 (2018). 73–82.3.Valavanidis, A., Vlachogianni, T., Fiotakis, K., &Loridas, S., International journalofenvironmentalresearch and publichealth10 (2013) 3886–3907.4.Ionescu, D., Margină, D., Ilie, M., Iftime, A., &Ganea, C., Food and chemicaltoxicology 61, (2013) 94–100.