La inmunización parenteral con microesferas de quitosano conteniendo la quimera BLSOmp31 induce la respuesta humoral y protege contra Brucella ovis en el modelo ratón

A. DIAZ; QUINTEROS D A; LLABOT J M; G. GHERSI; PALMA S.; ALLEMANDI D A.; F. A GOLDBAUM; S.M. ESTEIN

Mar del Plata

Congreso; SAFE 2013 Sociedad Argentina de Farmacologia Experimental; 2013

SAFE 2013

La inmunización parenteral con microesferas de quitosano conteniendo la quimera BLSOmp31 induce la respuesta humoral y protege contra Brucella ovis en el modelo ratón A.G. Díaz, D. Quinteros, J. Llabot, G. Ghersi, S. Palma, D. Allemandi, F. A Goldbaum, S.M. Estein Las proteínas recombinantes poseen un gran potencial como antígenos en el desarrollo de vacunas debido a su seguridad y especificidad. Sin embargo, generalmente requieren el empleo de adyuvantes para aumentar su inmunogenicidad. Objetivo: evaluar en el modelo ratón la respuesta inmunitaria humoral y la protección conferida por la inmunización con la quimera BLSOmp31 formulada en un nuevo sistema de liberación: las microesferas de quitosano (MEQ) contra Brucella ovis (BO). Animales y vacunas. Se inmunizaron ratones BALB/c hembras con A) MEQ+BLSOmp31 (n=3) y B) Quil A+BLSOmp31 (n=4). Los controles negativos fueron C) MEQ vacías (n=4) y D) No vacunado (n=4). Los animales recibieron dos dosis (vía subcutánea) los días 0 y 25. Determinación de anticuerpos séricos específicos. Los días 0 y 35 se obtuvieron muestras de suero para su análisis en Elisa indirecto anti-BLSOmp31. Desafío y ensayo de protección. El día 70 los ratones se inocularon por la vía intraperitoneal con 1,6x104 UFC de BO PA76250. Treinta días después se sacrificaron y sus bazos fueron extraídos, homogeneizados y sembrados para determinar las UFC/bazo. Las unidades de protección fueron calculadas como la diferencia entre el promedio de log10 UFC del grupo control (D) y el promedio de cada grupo. Resultados: Sólo se detectaron niveles de anticuerpos IgG significativos en los grupos inmunizados con la quimera BLSOmp31 (Grupos A y B). Las DO promedio ±D.E. fueron: 2,452±0,47, 2,397±0,34, 0,128±0,01, y 0,123±0,001, respectivamente para los grupos A, B, C y D. Los mejores niveles de protección se observaron en los ratones inmunizados con MEQ+BLSOmp31 (2,41±0,058 Log10 UFC de protección) mientras que en el grupo Quil A+BLSOmp31 fueron inferiores (1,46±0,297 Log10 UFC de protección). Conclusión. La formulación MEQ+BLSOmp31 administrada por la vía subcutánea indujo anticuerpos IgG específicos y confirió los mejores niveles de protección. Estos resultados alientan a ensayar dicha formulación en ovinos contra B. ovis.