CONICET | Buscador de Institutos y Recursos Humanos

Perfiles de proteínas citosólicas de hígado normal y hepatocitos de ratón hembra Yeves Alejandra, Ronchi Viginia, Chisari Andrea, Conde Rubén Instituto de Investigaciones Biológicas, Facultad de Ciencias Exactas y Naturales, Universidad Nacional de Mar del Plata, c.c. 1245, (7600) Mar del Plata, ARGENTINA. Email: pronchi@mdp.edu.ar Una dieta sin aminoácidos disminuye el contenido proteico de hígado de ratón y modifica el nivel de algunas proteínas citosólicas partícipes de importantes eventos metabólicos. El estudio in vivo de la regulación proteica por cambios nutricionales es complejo. Por ello, en ratón hembra, se comparó el perfil de proteínas citosólicas de hepatocitos incubados en medio completo con el de hígado bajo una dieta completa. Las proteínas citosólicas se separaron en 1D-SDS-PAGE y 2D-SDS-NEPHGE. Comparado con los perfiles in vivo, los hepatocitos mostraron: 1) baja proporción de componentes de pI 7-7.3 y tamaño inferior a 50 kDa; 2) que la proteína más abundante de pI > 9 posee un tamaño de 43 kDa en vez de 48 kDa; 3) la proporción de mGSTs es menor; 4) ausencia de proteínas menores de 18 kDa. Por otra parte, se analizó por Western blot la movilidad de la gliceraldehído 3-fosfato deshidrogenasa (GAPDH), proteína abundante y regulada por el nivel dietario de aminoácidos. La misma exhibió un tamaño de 66 kDa en los hepatocitos y 39 kDa in vivo. La banda de 66 kDa también se detectó in vivo, pero con una intensidad de 10% respecto del hepatocito. Por lo tanto, la GAPDH exhibiría un mayor grado de dimerización o interacciones con otras proteínas en los hepatocitos. No obstante las diferencias encontradas entre los sistemas in vivo e in vitro, los hepatocitos aislados pueden servir para examinar la regulación por cambios nutricionales de proteínas citosólicas. Financiado por CONICET, UNMDP, UNLP. Palabras claves: hepatocitos aislados, proteínas citosólicas, GAPDH

enviar mensaje