Efecto de gangliósidos sobre la distribución de proteínas unidas a membrana via glicosilfosfatidilinositol

CRESPO, P.M.; ZURITA, A.R.; DANIOTTI, J.L.

Los Cocos, Córdoba, Argentina

Congreso; XVII Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Neuroquímica (SAN); 2002

Sociedad Argentina de Neuroquímica (SAN)

BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR   POSTER     EFECTO DE GANGLIOSIDOS SOBRE LA DISTRIBUCION DE PROTEINAS UNIDA A MEMBRANA VIA GLICOSILFOSFATIDILINOSITOL Crespo, Pilar M.; Zurita, Adolfo R. y Daniotti, Jose L. CIQUIBIC, Facultad de Ciencias Químicas, UNC, Córdoba.  http://www.fcq.unc.edu.ar/ciquibic/   Las proteínas unidas a membrana vía GPI están principalmente agrupadas en microdominios enriquecidos en esfingolípidos y colesterol. En este trabajo se analizó la distribución de una proteína quimérica anclada vía GPI (GPI-YFP) en la membrana plasmática de células CHO-K1 con diferente composición de glicolípidos. La distribución de GPI-YFP sobre la superficie celular fue analizada utilizando el procedimiento de cross-linking con el reactivo bis(sulfosuccinimidyl)suberate (BS3), capaz de reaccionar con los grupos aminos de proteínas próximas. Los resultados indican que la proteína GPI-YFP forma dominios sobre la superficie de células que expresan GM3, o de células carentes de glicolípidos, o de células que expresan principalmente GD3 y GT3, o GM1 y GD1a, o principalmente GM2, o con alta expresión de GM1. Sin embargo, no se detectaron cambios significativos en los microdominios de GPI-YFP en los diferentes ambientes de glicolípidos provistos por las membranas de las líneas celulares bajo estudio. Por otro lado, células CHO-K1 salvajes expuestas a 100 µM de GM1 antes del tratamiento con el reactivo BS3 mostraron una dramática reducción en la cantidad de microdominios de proteínas GPI-YFP en membrana plasmática. Estos resultados indican que la manipulación del contenido y calidad de glicolípidos, mediante la modificación de la actividad biosintética de la célula, no afecta  significativamente la asociación de GPI-YFPs en la superficie celular de células CHO-K1. El efecto del gangliósido GM1 exógeno sobre la distribución de GPI-YFP en la superficie celular podría ser una consecuencia de la concentración del gangliósido alcanzado en la misma y/o el efecto de especies particulares de gangliósidos que lleva, probablemente, a modificaciones de la arquitectura y/o dinámica de la membrana plasmática.