Modulación diferencial de la infección por virus Herpes Simplex tipo-1 (HSV-1) en células de epitelio pigmentado de la retina mediante diferentes agonistas de los receptores X retinoideos (RXR)

AYALA PEÑA, V.B.; ARMIENTO, N.; SCOLARO, L.A.; GERMAN O. L.

Bahía Blanca

Jornada; JAM-JBS 2017; 2017

AAM, UNS Dept BByF, Centro de analistas clinicos distrito X y Colegio de bioquímicos provincia Bs As

Diversos agentes estresores generan daño en las células del Epitelio Pigmentado de la Retina (EPR), los cuales pueden causar distintas patologías, como la degeneración de la mácula relacionada a la edad (DMRE), cursando con la pérdida de la funcionalidad del ojo. La infección producida por HSV-1, genera patologías agudas y recurrencias, y se la ha propuesto como un posible factor de riesgo en la progresión de la DMRE. Hemos demostrado que agonistas de los RXR, protegen a las células del EPR de la apoptosis inducida por estrés oxidativo, e inhiben la translocación de p65NFkB al núcleo. Dado que la isoforma RXRα ha sido asociada a procesos de inhibición de la respuesta antiviral celular, y que su localización nuclear está relacionada a procesos anti-inflamatorios, nos propusimos estudiar el rol de los RXR durante la infección con HSV-1 en células de EPR en presencia o ausencia de agonistas de los RXR. Para ello, células de EPR humana (D407) se infectaron con HSV-1 o mock. Se las suplementó con el agonista de los RXR:RXR (LG100268), con el agonista de los heterodímeros y antagonista de los RXR:RXR (LG100754) o el vehículo. Se analizó el título viral mediante el ensayo de recuento de UFP; el efecto citopático (ECP) por microscopia de fase; la expresión de proteínas de la vía NFκB y RXRα por inmunocitoquímica y WB; y los niveles de ARNm de RXRα, PPARγ y el factor de crecimiento transformante (TGF)β mediante qRT-PCR. En este trabajo mostramos que la infección por HSV-1 generó un ECP característico y que el tratamiento con LG100268 lo redujo, como así también el título viral, lo cual no fue observable en aquellos tratados con LG100754. La infección viral incrementó la activación de la vía pro-inflamatoria NFkB, y disminuyó los niveles de ARNm de TGFβ y del receptor PPARγ, involucrados en las respuestas antiinflamatorias. Además, la infección incrementó la síntesis y expresión de RXRα, observándose una localización citoplasmática de este receptor, lo cual apoya una respuesta pro-inflamatoria.En las condiciones infectadas, el tratamiento con el agonista LG100754 disminuyó levemente la activación de la vía NFκB sin modificar la disminución de la expresión de PPARγ y TGFβ inducida por la infección. El tratamiento con LG100268 disminuyó la activación de la vía NFκB e incrementó los niveles de ARNm de PPARγ pese a no modificar los niveles de ARNm de TGFβ. Por otra parte el tratamiento con LG100268 disminuyó la expresión de RXRα apoyando el desarrollo de la respuesta antiviral celular, a diferencia del incremento pronunciado que indujo el agonista LG100754.En conclusión, nuestros resultados indican que la infección de las células de EPR por HSV-1 altera: la expresión y localización del RXRα y p65NFkB, y la expresión de PPARγ y TGFβ, favoreciendo un estado pro-inflamatorio. Además sugieren que distintos agonistas de los RXR modularían diferencialmente el curso de la infección viral dependiendo de la conformación de los RXR activada.